论文摘要
癫痫作为小儿神经内科的一种常见的慢性临床综合症其发病机制十分复杂,现有的临床观察及实验室研究结果表明癫痫患儿同时存在着免疫紊乱。小胶质细胞作为中枢神经系统的巨噬细胞,在中枢神经系统受损时可迅速激活,启动脑的内源性免疫应答反应,小胶质细胞的活化表现为细胞数目、形态和表面分子表达的可塑性变化。OX42是小胶质细胞的特异性标记物。糖皮质激素作为一种神经调质,具有调节脑神经和内分泌的作用,在离体细胞培养中,可以下调由细胞因子介导的小胶质细胞的增殖[1],研究发现糖皮质激素及其受体与癫痫的发病机制有关,认为其可能具有抑痫作用[2],但其机理及作用环节尚未完全明了。本实验通过免疫组化方法观察地塞米松在海人酸致痫大鼠癫痫发生、发展过程中小胶质细胞形态、数量及分布的变化,探讨糖皮质激素在癫痫发病中的作用,为糖皮质激素在临床上的应用提供理论依据。目的:观察地塞米松对海人酸致癫痫模型大鼠的行为学、电生理及海马CA3区小胶质细胞的形态变化。方法1动物分组将健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠49只按数字表法随机分为:正常对照组;海人酸+生理盐水（KA+NS）组和海人酸+地塞米松（KA+DEX）组。正常对照组不做任何处理,KA+NS组,大鼠腹腔注射NS（0.5mg/kg.d）4天,KA+DEX组,腹腔注射DEX（0.5mg/kg.d）4天。2行为学观察大鼠海马CA3区注射KA后,观察记录其行为学改变,采用Diehl分级标准,将大鼠惊厥表现分为6级。3脑电图采集给大鼠定位放置双侧皮层和海马电极,参考电极为鼻尖,记录脑电描记,纸速30mm/s,灵敏度20uv/mm,记录时间30min.。4免疫组化染色KA+NS组和KA+DEX组大鼠,在KA注射后3h、24h、7d,常规灌注取脑,取中脑和嗅球之间的脑组织修块,分别用15%、30%蔗糖溶液梯度脱水后,做冰冻切片,片厚40um,用小鼠抗大鼠OX42抗体（1:300）进行免疫组织化学染色,光镜观察、照相,并对海马CA3区OX42阳性细胞数进行计数。结果1行为学改变KA+NS组和KA+DEX组在注射KA后均出现癫痫样发作,KA+NS组与KA+DEX组无明显差异。2脑电图结果KA+NS组脑电图频发高幅棘慢波、尖慢波,KA+DEX组脑电图阵发性出现棘慢、尖-慢综合波,波幅较NS组低,正常对照组脑电无异常。3免疫组织化学结果与正常对照组比较,KA+NS组和KA+DEX组OX42阳性细胞表达增强。3h组KA+NS组和KA+DEX组OX42阳性细胞表达均增强,染色深,胞体增大,数目增多,排列紊乱,两组间无显著差异。48h及7d组KA+NS组和KA+DEX组OX42阳性细胞表达有显著差异。结论小剂量地赛米松短期干预KA致痫大鼠可在一定程度上抑制小胶质细胞的激活。
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