一种LDL选择性吸附剂的制备及其生物相容性的测定

论文摘要

业已证明人体血液中运输胆固醇的低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein, LDL ）的升高及其在血管壁中被氧化成氧化型的低密度脂蛋白是动脉粥样硬化的主要原因。高密度脂蛋白（High Density Lipoprotein, HDL）在胆固醇代谢中起良性作用,能阻止动脉粥样硬化的形成及恶化。因此,国内外学者都致力于如何设法降低LDL的水平而又不引起HDL损失的研究工作。近年来,去除LDL的血液净化疗法逐渐应用于临床,由于吸附剂吸附法对LDL能够更有效的吸附,故在不断探索中。本研究利用LDL分子呈正电性,配基肝素分子呈负电性,二者能够通过静电作用进行特异性相结合的原理,独特地将配基肝素以共价键的方式借助双官能团连接剂（戊二醛）的帮助下通过固-液非均相分两步合成法将其固载到载体（聚乙烯醇,PVA-1799）固体表面上而拟制得该目标LDL选择性吸附剂。本论文对所制得的LDL选择性吸附剂通过红外表征和XPS表面分析技术表明此技术能够成功地将配基肝素以共价键的方式固载到载体表面上;通过含量测定结果表明本技术可使每克载体的表面上约固载18 25μg的配基肝素。通过体外静态、动态吸附对所研制得的LDL选择性吸附剂的吸附性能进行了研究,结果发现在弱碱性（PH7.49.5）环境下本吸附剂对LDL具有较高的选择性吸附效力,对HDL几乎没有吸附效力;在动态循环24 h的接触吸附滤过过程中,该吸附剂对LDL的选择性吸附清除效率在60 %左右,达到较好的吸附效果。本研究还对所研制的LDL选择性吸附剂的生物相容性进行了初步评价考察,主要评价了材料的血液相容性和细胞毒性。血小板黏附实验和凝血实验表明本吸附剂对血小板黏附很少并其具有较好的抗凝血性能;溶血实验发现该吸附剂的溶血率<5%,表明本吸附剂具有良好的血液相容性。使用MTT法评价本吸附剂的细胞毒性,结果表明其细胞毒性试验反应为1级或0级。综上所述本吸附剂具有良好的生物相容性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 高血脂症与低密度脂蛋白
• 1.2.1 高血脂症
• 1.2.2 低密度脂蛋白与动脉粥样硬化[9]
• 1.3 低密度脂蛋白（LDL）的结构[10]
• 1.3.1 低密度脂蛋白的形成
• 1.3.2 LDL 的整体结构
• 1.3.3 载脂蛋白apoB-100 及LDL 受体结合位点
• 1.4 低密度脂蛋白吸附剂的研究现状
• 1.4.1 LDL 免疫吸附类
• 1.4.2 LDL 阴离子型吸附剂类
• 1.4.3 非离子型LDL 吸附剂类
• 1.5 低密度脂蛋白血液净化技术
• 1.5.1 双重滤过膜滤过法
• 1.5.2 硫酸右旋糖酐纤维素吸附法
• 1.5.3 免疫吸附法
• 1.5.4 肝素诱导的体外LDL 沉淀法
• 1.5.5 全血直接吸附法
• 1.6 课题设计
• 2 LDL 选择性吸附剂的制备研究
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 主要仪器和试剂
• 2.2.2 LDL 选择性吸附剂制备
• 2.2.3 对目标吸附剂的红外表征
• 2.2.4 对目标吸附剂的XPS 表面分析
• 2.2.5 对目标吸附剂的配基固定量分析
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 红外表征结果
• 2.3.2 XPS 表征结果
• 2.3.3 含量分析结果
• 2.4 小结
• 3 吸附剂对LDL 的吸附效能评价研究
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 主要仪器和试剂
• 3.2.2 对LDL 吸附效率的考察
• 3.3 结果与分析
• 3.3.2 接触时间对LDL 的静态吸咐效率的影响
• 3.3.3 接触时间对LDL 的动态吸咐效率的影响
• 3.4 小结
• 4 LDL 选择性吸附剂的血液相容性研究
• 4.1 前言
• 4.2 本吸附剂的血小板黏附试验
• 4.2.1 血小板黏附试验概述
• 4.2.2 主要仪器和试剂
• 4.2.3 实验方法与结果
• 4.3 本吸附剂的凝血性能试验
• 4.3.1 血凝分析仪对血液相容性的评价
• 4.3.2 试验试剂与仪器
• 4.3.3 试验步骤
• 4.3.4 检验结果
• 4.4 本吸附剂的溶血实验
• 4.4.1 主要仪器和试剂
• 4.4.2 试验步骤
• 4.4.3 试验结果与讨论
• 4.5 小结
• 5 LDL 选择性吸附剂的体外细胞毒性试验
• 5.1 前言
• 5.2 材料与方法
• 5.2.1 材料与试剂
• 5.2.2 主要仪器与设备
• 5.2.3 实验方法
• 5.3 实验结果
• 6 主要结论与后续工作建议
• 6.1 主要结论
• 6.2 后续工作建议
• 致谢
• 参考文献
• 附录