川西高原松茸生态及遗传多样性研究

论文摘要

本文对川西高原松茸主要产区九龙,丹巴,小金,雅江,理塘,稻城,乡城七个县的松茸资源生态环境进行了调查,并采集了32份松茸材料,应用RAPD,ITS RFLP和ITS序列分析等多种方法,对供试松茸样品的遗传特性进行了系统研究,结果如下。（1）川西高原松茸的突出特点包括分布地海拔高,松茸的生长海拔逐年升高;宿主多样,主要与黄背高山栎和川滇高山栎共生;出菇时间较早。（2） RAPD,ITS PCR-RFLP分析结果表明,在RAPD中,32个材料在GS=0.68时,被分为4个遗传群,各遗传群表现出一定的地域性;ITS rDNA PCR-RFLP聚类分析表明,在GS值为0.72的水平上供试材料可聚成7个遗传类群,绝大部分来自于相同或相似生态地理环境的材料聚成一类,即ITS-RFLP图谱类型与材料的生态地理环境具有一定的相关性;对各地理类群基于Nei氏无偏估计的遗传一致度的聚类分析表明,各地理类群间的遗传分化与其所处的地理生态环境具有较高的相关性。（3）根据RAPD,ITS PCR-RFLP结果,选取了8份松茸样品,进行了表型鉴定,并对其ITS片段进行了扩增、测序和系统发育分析。结果表明,经典的食用菌表型分类将8份材料归类为青冈口蘑和松口蘑两个种,但ITS序列系统发育结果表明,8份松茸样品ITS序列与已报道的NCBI号为AF367416、AF204806、AB368506等的Tricholoma matsutake序列在系统发育上高度同源,说明在分类上这些样品应属于同一个种。可见,经典的表型分类并不能反映菌株的系统发育地位,同时也说明,四川西南高原松茸菌间虽然存在一定的表型多样性和地理分化,但未达形成地理种的程度。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 文献综述
• 1.1 引言
• 1.2 国内外研究现状综述
• 1.2.1 松茸的分类地位
• 1.2.2 松茸的形态特征
• 1.2.3 松茸的生活史
• 1.2.4 松茸的生物学特性
• 1.2.4.1 营养特性
• 1.2.4.2 温度
• 1.2.4.3 湿度
• 1.2.4.4 酸碱度
• 1.2.5 松茸生态研究
• 1.2.5.1 松口蘑的地理分布
• 1.2.5.1 松茸的共生树种
• 1.2.5.2 气候
• 1.2.5.3 土壤
• 1.2.5.4 植被
• 1.2.5.5 松茸的生长规律
• 1.2.6 松茸菌塘研究
• 1.2.6.1.松茸菌塘的形成
• 1.2.6.2 松茸菌塘的结构
• 1.2.7 松茸资源的开发
• 1.2.7.1 松茸驯化栽培研究现状
• 1.2.7.2 松茸菌丝分离与培养
• 1.2.8 分子生物学研究
• 1.2.8.1 分子标记在真菌遗传多样性及分类鉴定上的应用
• 1.2.8.2 松茸的分子生物学研究
• 1.2.9 四川松茸研究现状
• 1.3 本研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 四川松茸的生态调查及表型观察
• 2.1.1 调查内容与方法
• 2.2 遗传多样性研及系统发育研究
• 2.2.1 样品采集
• 2.2.2 DNA提取
• 2.2.2.1 前处理
• 2.2.2.2 CTAB法
• 2.2.2.3 SDS法
• 2.2.3 RAPD分析
• 2.2.4 ITS PCR-RFLP分析
• 2.2.5 系统发育研究
• 2.2.5.1 代表菌株ITS序列测定
• 2.3 数据分析及处理
• 3 结果与分析
• 3.1 四川松茸的生态调查及表型观察
• 3.1.1 四川松茸主产区松茸分布
• 3.1.2 四川松茸的生态情况
• 3.1.3 表型特征
• 3.2 遗传特性分析
• 3.2.1 RAPD分析
• 3.2.1.1 随机引物的筛选:
• 3.2.2 ITS PCR-RFLP分析
• 3.2.2.1 供试松茸ITS酶切多态性
• 3.2.2.2 供试材料基于Nei-Li/Dice的遗传相似系数的聚类分析和组成分析
• 3.2.2.3 不同地理类群遗传多样性指数
• 3.2.2.4 ITS序列的同源性检索
• 3.2.3 ITS序列分析
• 4 讨论
• 4.1 四川松茸的分布与生态
• 4.2 四川松茸的RAPD和ITSPCR-RFLP
• 4.3 四川松茸的的系统发育及分类地位
• 4.4 进一步研究的建议
• 5.结论
• 参考文献:
• 附录
• 致谢