EPO抗体、EPO-R抗体、EPO酶切多肽影响EPO促红系增殖、分化研究

论文题目: EPO抗体、EPO-R抗体、EPO酶切多肽影响EPO促红系增殖、分化研究

论文类型: 硕士论文

论文专业: 病理学与病理生理学

作者: 黄学文

导师: 牟信兵

关键词: 促红细胞生成素,红系集落形成单位,胰蛋白酶,多肽,抗体,受体

文献来源: 第三军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:高原红细胞增多症是由慢性高原低氧引起的红细胞继发性过度增多。高原红细胞增多症的病人转移到平原及低海拔地区后红细胞可以恢复到正常,次说明高原红细胞增多症病人的红细胞是可控可调的,EPO是红系发育、增殖、分化的最主要的调控细胞因子,EPO及EPOR在高原红细胞增多症发病机制中起关键性作用,从这点出发,如能对红细胞的生成进行调控,便可以对高原红细胞增多症进行有效治疗。本文旨在研究在高原条件下通过大鼠骨髓红系CFU-U培养,观察EPO抗体、EPOR抗体、EPO酶解多肽能否抑制红系的增殖与分化,为高原红细胞增多症的治疗提供必要的动物实验基础资料。方法:试验选用SD大鼠,体重150克-200克,抽血查血常规。将其处死,消毒后取出股骨,用DMEM细胞培养液冲出骨髓,用大鼠淋巴细胞分离液离心分离单个核细胞,用甲基纤维素法进行体外红系CFU-E培养。用胰蛋白酶对EPO酶解,得EPO酶解多肽片段,并用SDS聚丙稀酰胺凝胶蛋白电泳法对酶切片段进行鉴定。按以下分组条件进行红系定向CFU-E培养:第一部分分4个条件组:(1)空白对照培养组(Control) (不加EPO);(2)EPO常规培养组(加EPO);(3)EPO+EPO抗体培养组(既加EPO又加EPO抗体);(4)EPO+EPOR抗体培养组(既加EPO又加EPOR抗体);第二部分分4个条件组:(1)空白对照培养组(不加EPO);(2)EPO常规培养组(加EPO);(3) EPO+ ITT培养组(EPO+经酶抑制剂处理后的胰蛋白酶);(4) EPO+ EPO酶切片段培养组(EPO+EPO酶切片段)。在饱和湿度、37℃、5%CO2培养7天后进行红系集落形成单位(CFU-E)计数及CFU-E内细胞数计数判别EPO抗体、EPO酶解多肽是否能拮抗EPO促红系增殖、分化作用。CFU-E的判别标准:集落内细胞数大于或等于8个细胞,红系细胞为橘红色。结果:空白对照培养组(Control)无CFU-E。EPO常规培养组CFU-E集落数较多,EPO+EPO抗体培养组CFU-E集落数较少,两组比较,P<0.01,有非常显著性差异。EPO常规培养组CFU-E集落内细胞数较多,EPO+EPO抗体培养组CFU-E集落内细胞数较少,两组比较,P<0.01,有非常显著性差异。EPO+EPOR抗体培养组CFU-E集落数较多,与EPO常规培养组比较,P>0.05,无显著性差异。EPO+EPOR抗体培养组CFU-E集落内细胞数较多,与EPO常规培养组比较,P>0.05,无显著性差异。EPO+EPO酶切片段组CFU-E集落数较少,与EPO常规培养组比较,P<0.01,有非常显著性差异。EPO+EPO酶切片段组CFU-E集落内细胞数较少,与EPO常规培养组比较,P<0.01,有非常显著性差异。结论:1.EPO抗体能对抗EPO促红系增殖、分化,EPO抗体是治疗高原红细胞增多症的可能药物,有必要进一步研究。2.胰蛋白酶酶解EPO所得多肽片段能对抗EPO促红系增殖、分化,推测其为治疗高原红细胞增多症的可能药物与途径之一,有必要进一步研究。3. EPOR抗体不能对抗EPO促红系增殖、分化。

论文目录:

英文缩写一揽表

英文摘要

中文摘要

正文 EPO 抗体、EPO-R 抗体、影响EPO、EPO 酶切多肽促红系增殖、分化研究

前言

第一部分 EPO、EPOR 抗体影响EPO 促红系增殖分化功能研究

材料和方法

结果

讨论

第二部分 EPO 酶解多肽影响EPO 促红系发育、增殖生物活性的研究

材料和方法

结果

讨论

全文讨论

全文结论

致谢

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参考文献

文献综述 高原红细胞增多症发病机制

参考文献

研究生期间发表的文章

发布时间: 2009-02-10

参考文献

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