胰高血糖素样肽-I对牛肝细胞PCmRNA和PEPCKmRNA丰度的影响

胰高血糖素样肽-I对牛肝细胞PCmRNA和PEPCKmRNA丰度的影响

论文摘要

以糖异生和脂肪动员紊乱为病理学基础的酮病和脂肪肝是奶牛围产期常见多发的能量代谢障碍性疾病。哺乳动物的GLP-I序列完全保守,指示其具有重要的生理作用。本研究通过牛肝细胞原代培养实验和实时荧光定量PCR方法,探讨了GLP-I对丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶基因表达的调控作用,为揭示奶牛脂肪肝等围产期能量代谢障碍性疾病肝糖异生的调控提供实验和理论依据。通过比较剪切法和灌流法两种肝细胞的培养方法,证实采用灌流法方法培养的肝细胞,去除红细胞效果好,所分离的肝细胞较纯,细胞存活率高,贴壁效果好,可满足实验的要求。采用实时荧光定量PCR技术,测定了细胞培养液中添加不同浓度的GLP-I对新生犊牛单层原代培养肝细胞中PC mRNA和PEPCK mRNA表达水平的影响。结果表明:①随着细胞培养液中GLP-I浓度的增加,肝细胞PEPCK mRNA丰度呈先升高后降低趋势,各浓度组之间差异显著(P<0.01)②随着细胞培养液中GLP-I浓度的增加,肝细胞PC mRNA丰度呈先升高后降低趋势,各浓度组之间差异显著(P<0.01)。

论文目录

  • 内容提要
  • 英文缩写词表
  • 引言
  • 第一篇 文献综述
  • 第一章 肝糖异生和脂肪动员关键酶在围产期奶牛酮病、脂肪肝发生发展中的作用
  • 1 糖异生关键酶与能量代谢的调节
  • 2 脂肪动员关键酶与能量代谢的调节
  • 3 神经内分泌因子对肝糖异生的调节作用
  • 4 神经内分泌因子对脂肪动员的调节作用
  • 5 神经内分泌因子之间的相互作用
  • 第二章 胰高血糖素样肽-I 的生物学功能
  • 1 生物化学方面
  • 2 生理学方面
  • 3 病理生理学方面
  • 第二篇 研究内容
  • 第一章 新生犊牛肝细胞培养方法的优化
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 第二章 GLP-I 对体外培养牛肝细胞PEPCK mRNA 和PC mRNA 表达的影响
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 导师简介
  • 作者简介
  • 致谢
  • 相关论文文献

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