HSP27在大鼠磨牙及其发育中的分布研究

论文摘要

目的:通过分析大鼠磨牙及其发育过程中,Hsp27 在成釉器中的表达,阐明Hsp27 在牙釉质、牙本质形成中的作用。方法:（1）为了获取胚胎鼠的牙胚,将怀孕17 天的Wistar 大鼠一只,颈部脱臼处死,切取包括牙胚在内的周围组织。然后将其浸入冰冷的40g/L 0.1M 多聚甲醛磷酸缓冲液中, 4℃下固定24 小时（PH7.3）。（2）28 只Wistar雌鼠（1,5,11,14,21,30,100 天,各4 只）断头处死后,将分离的下颌骨浸入同样的固定液中,于4℃下固定24 小时（PH7.3）。随后,在15%的EDTA 脱钙液中,于4℃脱钙1-10 周（3）将来自于胎鼠的牙胚及幼鼠和成鼠的下颌骨制备成石蜡切片,然后,用Hsp27 多克隆抗体,采用SABC 法,对每张切片进行免疫组化。随后做图像分析测定不同发育阶段的成釉细胞、成牙本质细胞、无釉区细胞的免疫表达水平,所得数据用SPSS11.5 软件进行统计分析。结果:（1）在成釉细胞形成过程中,Hsp27 首先出现在前成釉细胞中,在釉质分泌阶段和成熟阶段,Hsp27 的阳性免疫反应逐步增强（1 天,0.25048±0.007411; 5 天,0.29456±0.011328 ;11 天,0.36398±0.008039 P 分别<0.01 ）。14 天时,成釉细胞已进入成熟阶段晚期,其免疫反应与11 天时的水平（14 天,0.36778±0.053316）相同。（2）正在分化和已分化的成牙本质细胞中,有Hsp27的阳性反应。随着成牙本质细胞的发育成熟,出现了强烈HSP27反应。虽然冠部成牙本质细胞一直有强烈的阳性反应。而在21 天时,髓底的成牙本质细胞Hsp27 免疫反应为弱阳性或阴性。（21 天,0.15041±0.045361）。随着牙根的发育,髓底和牙根侧的成牙本质细胞对Hsp27 的反应逐步增强（30天,0.24151±0.007217;100 天,0.37384±0.044072 P 分别<0.01）。（3）值的注意的是,不能形成牙釉质的无釉区细胞,在牙胚发育5-11 天时,有显著的Hsp27 表达（5 天,0.35334±0.006531;11 天,0.36815±0.016382 P>0.05）。但在14 天以后又伴随凋亡而减少（14 天,0.27674±0.043108 P<0.01 ）。结论:（1）Hsp27 可以看作区别内釉上皮细胞和前成釉细胞的有用标志物（2）反映成牙本质细胞分化程度。（3）无釉区决定了牙本质在牙尖处的形态,而Hsp27 在无釉区的表达起着凋亡抑制剂的作用。

论文目录

• 摘要
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 第二章 结果
• 2.1 成釉细胞
• 2.2 成牙本质细胞
• 2.3 无釉区
• 第三章 讨论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 个人简介
• 致谢