论文题目: 神经生长因子和胶原蛋白的LIF-CE分析方法研究及应用
论文类型: 博士论文
论文专业: 营养与食品卫生学
作者: 邹晓莉
导师: 黎源倩
关键词: 激光诱导荧光检测,毛细管区带电泳,神经生长因子,胶原蛋白,脊髓,组织化工程肌腱,肌腱细胞
文献来源: 四川大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的：为了进一步研究神经损伤修复的机制及探索肌腱组织工程研究中支架材料和种子细胞的变化情况，选择两种蛋白质-神经生长因子(Nerve growth factor，NGF)和胶原蛋白(Collagen)，将卫生检验中的高新技术与生化和临床医学理论研究相结合，建立激光诱导荧光检测-毛细管电泳分析这两种蛋白质的方法，为指导临床采用神经生长因子治疗疾病和寻求组织工程技术治疗肌腱缺失的最佳条件，提供快速、灵敏的分析手段和可靠的实验数据。 方法：考察了影响上述两种蛋白质测定的各种因素，分别进行了如下工作： 1．NGF的纯化 采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离纯化了大鼠脊髓中的NGF，利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测产品的纯度，Western杂交法检验其免疫活性。为建立神经生长因子的毛细管电泳免疫分析方法提供高纯度的NGF(抗原)。 2．激光诱导荧光检测-毛细管电泳免疫分析NGF 大鼠脊髓样品中的NGF经磷酸盐溶解及真空冷冻干燥浓缩后，与异硫氰酸荧光素(FITC)标记的NGF单克隆抗体发生抗原抗体的特异性结合反应，经毛细管区带电泳分离复合物、游离抗体和游离的FITC，测定了大鼠脊髓损伤前后
论文目录:
中文摘要
Abstract
前言
参考文献
第一部分 神经生长因子的纯化
1、前言
2、实验部分
2.1 仪器
2.2 试剂
2.3 实验方法
3、结果与讨论
3.1 样品的前处理方法
3.2 凝胶电泳条件的选择
3.3 分离所得 NGF分子量的测定
3.4 Western杂交
3.5 蛋白质洗脱
3.6 NGF纯品的干燥和保存
3.7 HPLC检验产品纯度
4、小结
参考文献
第二部分 激光诱导荧光检测-毛细管电泳免疫分析法测定大鼠脊髓中神经生长因子含量
1、前言
2. 实验部分
2.1 实验原理
2.2 仪器
2.3 试剂
2.4 实验方法
3. 结果与讨论
3.1 NGF抗体标记条件的选择
3.2 抗原抗体反应的选择
3.3 电泳条件的选择
3.4 线性范围和检出限
3.5 方法精密度
3.6 加标回收实验
3.7 方法对比
3.8 样品的测定
4、小结
参考文献
第三部分 激光诱导荧光检测-毛细管区带电泳测定肌腱和细胞中的胶原蛋白
1、前言
2. 实验部分
2.1 实验原理
2.2 仪器:同第二部分
2.3 试剂
2.4 实验方法
3. 结果与讨论
3.1 样品水解条件的选择
3.2 经脯氨酸的衍生化反应条件的选择
3.3 电泳条件的选择
3.4 内标物的选择
3.5 干扰实验
3.6 方法性能考察
3.7 样品的测定
4. 小结
参考文献
综述 亲和毛细管电泳的应用进展
1. 前言
2. 配体与受体之间相互作用的研究
2.1 药物与其受体的结合反应
2.2 生物分子的结合反应
3. 亲和毛细管电泳物质的手性异构分离中的应用
3.1 蛋白质作为手性选择剂的异构体分离
3.2 抗生素作为手性选择剂的异构体分离
3.3 糖作为手性选择剂的异构体分离
3.4 其他物质作为手性选择剂的异构体分离
4. 亲和毛细管电泳在物质分离定量中的应用
4.1 蛋白质的亲和毛细管分离定量
4.2 其它物质的亲和毛细管电泳分离定量
5. 其他领域的应用
6. 展望
参考文献
论文与获奖
致谢
发布时间: 2007-01-23
参考文献
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- [2].HCMV感染神经瘤细胞对其神经生长因子和受体表达影响的研究[D]. 王海涛.青岛大学2009
- [3].神经生长因子和醛糖还原酶抑制剂在糖尿病周围神经病发病机制中作用的研究[D]. 卫重娟.天津医科大学2002
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