新疆紫花苜蓿中有效化学成分分析及其抗氧化性研究

论文摘要

紫花苜蓿（Medicago sativa L.）为豆科植物,是一种传统的中药材,具有清脾胃、清热解毒、凉血通淋,利大小肠之功效,有益于五脏。但它更广泛的还是作为牧草,或加工成草捆、草块、草颗粒、草粉等作为饲料产品。随着对植物资源的开发应用,目前对紫花苜蓿的研究主要集中在叶蛋白,皂苷以及多糖上,对其他化学成分的报道较少,尤其是对紫花苜蓿中单宁及其有效化学成分的抗氧化性研究,未见任何报道。第一章对紫花苜蓿的研究进展,以及单宁,叶蛋白、纤维素,金属元素,挥发油,抗氧化性的研究方法进行了综述。第二章探讨了紫花苜蓿提取单宁的工艺条件和光度法测定条件。在756nm波长下,以钨酸钠-磷钼酸为显色剂测定紫花苜蓿中单宁的含量。单宁量在2.04-12.24μg/mL范围内线性关系良好,标准方程Y=35.38x+0.0069,相关系数r= 0.9993。方法的回收率为95.32%-103.3%。单宁的提取工艺条件为盐酸浓度2.5%,乙醇浓度70%,提取温度50℃,回流5小时,紫花苜蓿样品中单宁的提取量为2.15mg/g。第三章对紫花苜蓿中叶蛋白和水溶性膳食纤维的提取工艺进行了研究。通过单因素和正交实验,以提取率为指标,得出影响苜蓿干草中叶蛋白提取的最主要因素是料液比,最佳工艺条件为料液比1:40,加盐量1%,预浸12h,pH3.5,60℃条件下絮凝7min。其次利用加酸加热法提取了紫花苜蓿的水溶性膳食纤维,为淡黄褐色粉末。通过单因素和正交实验,以提取率为指标,从提取过叶蛋白的紫花苜蓿草粉和紫花苜蓿（原草）中提取水溶性膳食纤维,最佳提取工艺条件为:浸泡温度70℃,浸泡时间10 h,提取液的pH为4,液固比为1:75,提取率分别为4.43%和4.51%。紫花苜蓿（原草）水溶性膳食纤维的提取率（4.51%）略高于处理过叶蛋白草粉的提取率（4.43%）。第四章采用湿法溶样,火焰原子吸收光谱法测定了紫花苜蓿中10种金属元素的含量。紫花苜蓿中含有较丰富的钙、镁、铁和钴。其中含Ca 18 g/kg;Mg 1.28 g/kg; Fe 0.182g/kg; Co 0.145g/kg。并且苜蓿经过提取叶蛋白、水溶性膳食纤维之后,钙的含量变化不大。第五章对新疆紫花苜蓿中含有的挥发油和籽中脂肪酸的化学成分进行了分析。采用水蒸气蒸馏法提取紫花苜蓿中的挥发油,通过GC-MS对其进行结构分析,并检索,从紫花苜蓿挥发油中初步确定了53种化合物结构,占挥发性物质含量的95.6%,主要成分醛类占挥发油总量的26.06%,其次酮类化合物为14.57%,醇类化合物为14.02%,芳烃类化合物为12.14%,杂环类为9.25%等。用石油醚为溶剂提取紫花苜蓿籽中的脂肪酸,甲酯化处理后,利用GC-MS对其进行结构分析,鉴定出11种脂肪酸成分,占总量的86.71%,其中不饱和脂肪酸占62.31%。第六章紫花苜蓿的不同溶剂提取物,采用体外实验测定其的抗氧化活性。结果表明:紫花苜蓿各提取物都有清除O2-·, ?OH能力和还原能力。其中乙酸乙酯萃取物的清除作用是最强的,并且乙醇提取物的活性比水提物的活性要高。同时与葡萄叶、石榴叶乙醇提取物的抗氧化活性进行了比较。第七章对今后的工作提出了一些建议和想法。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1 紫花苜蓿简介
• 2 紫花苜蓿化学成分研究简介
• 3 本课题研究的目的和意义
• 4 紫花苜蓿中化学成分简介
• 4.1 单宁酸概述
• 4.2 植物单宁的作用
• 4.3 单宁的提取方法
• 4.4 单宁的分析方法
• 5 紫花苜蓿叶蛋白和水溶性膳食纤维的提取工艺研究
• 5.1 叶蛋白的特性
• 5.2 紫花苜蓿中水溶性膳食纤维的提取工艺研究
• 6 微量元素概述
• 6.1 微量元素简介
• 6.2 必需微量元素的生理功能
• 6.3 微量元素的分析
• 7 挥发油和脂肪酸概述
• 7.1 挥发油概述
• 7.2 脂肪酸概述
• 8 天然抗氧化剂的研究
• 8.1 天然抗氧化剂
• 8.2 氧自由基的主要检测技术手段
• 8.3 天然抗氧化剂的抗氧化机理
• 第二章 紫花苜蓿中单宁的含量测定及提取工艺研究
• 1 实验部分
• 1.1 仪器与试剂
• 1.2 实验方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 不同pH值下测定波长的选择
• 2.2 Folin-Denis显色剂用量的选择
• 2.3 显色温度的选择
• 2.4 显色时间的选择
• 2.5 新疆紫花苜蓿单宁提取液稳定性
• 2.6 单宁标准曲线的绘制
• 2.7 提取液中单宁的测定
• 2.8 加标回收试验
• 3 新疆紫花苜蓿单宁的提取工艺研究
• 3.1 单因素实验
• 3.2 提取方法的正交设计方案
• 4 结论
• 第三章 紫花苜蓿中叶蛋白和水溶性膳食纤维的提取工艺研究
• 第一节 紫花苜蓿中的叶蛋白提取工艺研究
• 1 实验部分
• 2 提取工艺条件研究
• 3 正交实验
• 4 结论
• 第二节 紫花苜蓿中的水溶性膳食纤维提取工艺研究
• 1 实验部分
• 2 提取工艺条件研究
• 3 正交实验
• 4 紫花苜蓿（原草）水溶性膳食纤维的提取
• 5 结论
• 第四章 紫花苜蓿中金属元素的测定
• 1 试验部分
• 1.1 仪器及试剂
• 1.2 原料及处理方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 仪器测试条件
• 2.2 工作曲线的建立
• 2.3 金属元素含量测定结果
• 2.4 精密度、回收率测定结果
• 2.5 提取过叶蛋白后的紫花苜蓿草渣中钙含量测定
• 2.6 提取过叶蛋白和水溶性膳食纤维的草渣中钙含量测定
• 3 结论
• 第五章 紫花苜蓿挥发油及籽中脂肪酸化学成分的GC-MS分析
• 第一节 紫花苜蓿中挥发油化学成分分析
• 1 实验部分
• 2 结果与讨论
• 3 结论
• 第二节 紫花苜蓿籽中脂肪酸的成分分析
• 1 实验部分
• 2. 结果与讨论
• 第六章 紫花苜蓿中各提取物的体外抗氧化作用研究
• 1 实验部分
• 1.1 材料与仪器
• 1.2 实验方法
• 2 结果与分析
• 2^-·的清除作用'>2.1 不同溶剂提取物对O₂^-·的清除作用
• 2.2 不同溶剂提取物对羟自由基的清除作用
• 2.3 各提取物还原能力的比较
• 3 结论
• 3.1 紫花苜蓿不同溶剂提取物的抗氧化性比较
• C的抗氧化活性比较'>3.2 紫花苜蓿、葡萄叶、石榴叶乙醇提取物与V_C的抗氧化活性比较
• 第七章 展望
• 参考文献
• 硕士期间发表论文情况
• 致谢