论文摘要
本研究为探索黄花石榴(Punica granatum var.flavescens SW.)组织培养的有效途径及快繁体系,以黄花石榴当年生带芽茎段、叶片和花萼为外植体,通过正交试验设计,探讨了黄花石榴组织培养的关键影响因素、存在问题及解决方法、最佳培养配方及培养程序,系统研究了黄花石榴的组织培养及植株再生,为工厂化育苗提供了理论与技术依据。本试验主要研究结果如下:1.最佳取材季节:黄花石榴外植体的最佳取材季节是春季,在4月份取材,外植体的启动率、出愈率最高,茎段分别可达76.67%、69.47%,叶片出愈率最高达70.00%,花萼出愈率最高达60.00%;而污染率、褐变率最低,茎段、叶、花萼污染率分别为10.41%、10.00%、8.51%,茎段、叶、花萼褐变率分别为18.83%、24.33%、44.26%。2.防褐变处理试验:由于黄花石榴的植株各部位接种后均引起不同程度的褐变,添加附加物能相对降低褐变率,结合出愈率,以分别添加Vc100mg/L,AClg/L的处理效果较好,褐变率分别为18.89%、20.74%。3.带芽茎段初代培养:综合分析有利于茎段综合初代培养的条件是MS+NAA0.05mg/L+BA 1.0mg/L,启动率达76.67%、出愈率达43.33%、出芽指数达3.3。4.叶片和花萼愈伤组织诱导:有利于黄花石榴叶片愈伤组织诱导的培养基配方组合为:MS+NAA0.2mg/L+BA4.0 mg/L,出愈率达59.39%;有利于花萼愈伤组织诱导的培养基配方组合为:MS+NAA0.1mg/L+BA2.0 mg/L,出愈率达60.00%。5.增殖与分化培养:有利于黄花石榴新梢增殖的培养基配方组合为:MS+NAA0.1mg/L+BA2.0mg/L,增殖倍数达4.8,有效苗倍数达3.5;有利于叶片愈伤组织增殖的培养基配方组合为:MS+2,4-D0.1mg/L+NAA0.2mg/L+BA2.0mg/L,增殖率可达76.67%;有利于花萼愈伤组织增殖的培养基配方组合为:MS+2,4-D0.1mg/L+NAA0.1mg/L+BA2.0mg/L,增殖率最高可达56.67%。6.生根培养:结合生根率、平均根数、平均根长三个指标,综合试验数据分析,有利于诱导单芽生根的培养基配方组合为:1/2MS+蔗糖20g/L+NAA0.1mg/L+IBA1.0mg/L+AC0.5g/L,生根率可达78.33%,平均根数最高可达38.00条,平均根长可达2.47cm。7.炼苗与移栽:最适于黄花石榴生根瓶苗的炼苗基质为:蛭石:珍珠岩:河沙=1:2:1,成活率达66.67%,且苗长势良好。
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