论文摘要
海藻真菌是泛指生活在海藻（主要是红藻、绿藻和褐藻）体表或体内的一类真菌。海藻真菌可以参与宿主的许多生命活动,其中尤其引人注目的是可作为化学防御的来源,保护宿主免受微生物侵袭,维持宿主与其它海藻的平衡,从而使其代谢产物具有许多独特的结构类型和生物活性。为了寻找具有良好生物活性的先导化合物,本文采用活性追踪和现代化学分析相结合的方法对海藻真菌次级代谢产物进行研究。内容包括:采用特异性方法分离海藻真菌,活性菌株的复筛与发酵条件的考察,活性成分的追踪分离,单体化合物的结构鉴定和活性评价。采用特异性分离海藻真菌的方法对采自黄海海域的28种海藻样品进行处理,共获得海藻菌株221株,采用海虾生物致死法和人慢性髓性白血病细胞K562为筛选模型对其发酵产物进行抗肿瘤活性筛选,得到具有海虾生物致死及细胞毒活性菌株各8株。筛选活性率为7.2%。通过抗肿瘤活性筛选和现代化学分析相结合的方法,选用2株活性较强,次级代谢产物较为丰富的菌株m-3-4和i-1-1作为研究对象,对其活性次级代谢产物进行了系统研究。通过培养方式的比较、培养基选择试验及发酵时间试验,确定了两株目标菌的大量发酵条件。经大量发酵和乙酸乙酯的萃取,得到活性部位浸膏;反复运用正相、反相硅胶柱色谱,LH-20凝胶柱色谱,HPLC制备色谱等分离纯化手段,从m-3-4的代谢产物中分离得到4个化合物单体,从i-1-1中分得11个单体化合物。通过解析波谱数据并结合理化常数阐明了其中11个化合物的结构,分别为:新桔霉素衍生物（1）,青霉菌醇（2）, Cladosporin（3）,麦角甾醇（4）,citrinin（5）,大黄素emodin（6）, gliotoxin（7）,环（脯氨酸-色氨酸）（8）,demethoxyfumitremorgin C（9）,（2R,3S）-2,3,4-trimethyl-2,3-dihydrobenzofuran-5,7-diol（10）,dimethyl 2,2’-（4,4’-oxybis（4,1-phenylene））diacetate（11）。并对已解出的化合物进行了抗肿瘤活性的初步评价（实验室已评价过的未作）,其余四个化合物结构正在解析中,其活性尚未测试。本文采用特异性分离海藻真菌的方法分离得到221株海藻真菌,经活性筛选得到16株活性菌株,对其中2株活性真菌的代谢产物进行分离得到15个单体化合物,其中化合物1是一个新化合物,化合物7是一个高活性化合物,对多种肿瘤细胞具有很强的细胞毒活性。本论文为研究海藻真菌中抗肿瘤活性成分供了活性菌株资源。