金耳菌丝体抗凝血有效部位研究

论文摘要

金耳是一种珍贵的食用菌和药用菌。本实验的目的是确定并提取金耳菌丝体抗凝血的活性部位，观察其抗凝血的作用，初步探讨其作用机制，达到减毒增效的目的，为进一步分离有效成分和开发使用提供实验依据。本试验分别从药效学和化学两方面对金耳抗凝血活性部位进行筛选，以凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间作为活性追踪指标，确定了抗凝血的活性部位，进一步对活性部位进行化学鉴定和色谱鉴定，最终确定了金耳香豆素成分是高效的抗凝血活性成分。为了使其抗凝血作用更好的发挥，以香豆素的含量为指标，采用正交设计和紫外分光光度法对金耳香豆素类成分的提取工艺进行优化，并确定了最佳提取工艺为：70％乙醇6倍量生药量加热回流提取3次，每次1小时。接着以香豆素的含量为指标，采用大孔树脂法定向富集活性成分，首先优选出D101型大孔吸附树脂，确定了上样量为1：15(提取物：树脂)，上样浓度为0.05g／ml，最后确定了制备工艺为水洗脱至无色，50％乙醇洗脱(200ml)。按以上制备工艺得到的金耳香豆素类化合物含量为34.84％。该部位的制备为下一步药效试验的顺利进行打下了坚实的基础。最后以补骨脂素为对照品，通过线形范围的研究；精密度，稳定性，重现性及加样回收试验的方法学考察，建立了金耳香豆素类成分含量测定方法。并通过抗凝血的药理试验，进一步证明了金耳香豆素类成分为其抗凝血的活性成分，也初步探讨了其抗凝血的药理机制。为今后生产应用提供了可靠的依据。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1 金耳菌概述
• 2 金耳液体发酵研究状况
• 2.1 食药用菌液体发酵概况
• 2.2 食药用菌液体发酵产物的作用
• 2.3 食药用菌液体发酵的特点
• 2.4.金耳液体发酵研究情况
• 2.5 结论和展望
• 3 金耳化学成分概述
• 4 金耳药理作用研究状况
• 4.1 药理活性作用
• 4.2 毒性试验
• 5 凝血机制
• 6 选题的目的、意义及研究内容
• 第二章 金耳菌丝体抗凝血有效部位筛选
• 1 金耳菌丝体不同极性部位抗凝血活性实验
• 1.1 仪器药品和试剂
• 1.2 方法与结果
• 1.3 小结
• 2 金耳菌丝体抗凝血有效部位确定
• 2.1 材料及仪器
• 2.2 方法与结果
• 2.3 小结
• 第三章 金耳菌丝体抗凝血有效部位提取工艺研究
• 1 方法学考察
• 1.1 仪器及材料
• 1.2 方法与结果
• 2 金耳菌丝发酵物香都素类化合物提取工艺
• 2.1 仪器及材料
• 2.2 方法与结果
• 2.3 小结
• 第四章 抗凝血活性部位大孔树脂富集工艺优化
• 1 树脂的筛选
• 1.1 实验仪器及材料
• 1.2 实验方法与结果
• 1.3 小结
• 2 样品浓度及上样量的确定
• 2.1 实验仪器及材料
• 2.2 实验方法和结果
• 2.3 小结
• 3 非梯度洗脱
• 3.1 实验仪器及材料
• 3.2 实验方法与方法
• 3.3 小结
• 4 工艺流程的确定
• 4.1 工艺参数
• 4.2 工艺流程
• 第五章 金耳香豆素类化合物含量测定及抗凝血药理实验
• 1 含量测定
• 1.1 实验仪器及材料
• 1.2 实验方法与结果
• 1.3 小结
• 2 金耳香豆素类化合物抗凝血药理实验
• 2.1 实验仪器及材料
• 2.2 实验方法与结果
• 2.3 小结
• 第六章 结论与展望
• 参考文献
• 附录
• 致谢