论文摘要
本研究以清香木(Pistacia weinmannifolia)当年生幼嫩带芽茎段、叶片和叶轴为试验材料,通过正交实验设计结合方差分析和多重比较,探讨了清香木离体培养的关键影响因素,存在问题及解决方法,最佳培养配方及培养程序,从而为建立清香木的快繁体系、工厂化生产提供理论与技术依据。通过组织培养技术研究得出:①清香木外植体组织培养茎段和叶轴最佳取材季节为4月,启动率高,污染率相对其他时期较低,启动率分别为94.00%和90.00%,污染率分别为21.67%、和20.33%。叶片外植体几乎没有启动,但污染率仍以4月取材最低,为18.00%,启动率仅为3.00%。②清香木外植体用0.1%HgCl2灭菌处理,茎段的最佳灭菌时间为7min,启动率为85.00%,污染率为25.00%;叶片和叶轴最佳处理时间均为5min,启动率分别为:2.00%、80.00%,污染率分别为:29.33%、30.00%。③初代培养:茎段培养以MS+6-BA0.5mg·L-1+2,4-D0.01mg·-1为最适宜培养基配方组合,启动率高达99.33%,出愈率86.67%,出芽指数1.8;叶轴培养以MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+2,4-D0.05mg·L-1为最适宜培养基配方组合,出愈率85.00%。④继代增殖与茎段愈伤组织分化培养:适宜于腋芽继代增殖培养的最优培养基组合是MS+6-BA0.5mg·L-1+2,4-D0.1mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,增殖倍数达4.1,有效苗数3.5。最有利于清香木愈伤组织增殖的培养基配方组合为:MS+6-BA1.0mg·L-1NAA 0.1mg·L-1+2,4-D1.0mg·L-1,增殖率为83.53%。适宜于茎段愈伤组织分化的培养基组合是:MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1,分化率可达74.51%。⑤生根培养:以1/2MS+NAA0.1mg·L-1+IBA1.0 mg·L-1AC0.3%为最适宜培养基配方组合,植株生长健壮,生根时间为31.5d,生根率达82.5%,平均根数为4.9条,平均根长为3.3cm。⑥移栽与炼苗:炼苗基质以蛭石25%+珍珠岩25%+河沙50%效果最好,成活率最高,达到68.00%,且植株长势良好。
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