肌肉生长抑制素（Myostatin）及其相关基因在绵羊肱二头肌发育中的表达分析

论文摘要

肌肉抑制素基因-Myostatin （MSTN） ,又称GDF-8,属TGF-β（transforming growth factor beta）超家族成员,是肌肉生长发育的负调节因子。对该基因表达的抑制可引起成肌细胞的过度增殖和肌纤维的肥大,从而引起骨骼肌增生。本实验以小尾寒羊×杜伯羊羔羊为实验动物,采集从出生到7周不同发育时期肱二头肌,利用Realtime PCR技术对肌肉抑制素（myostatin, MSTN）及其相关基因胰岛素样生长因子I （insulin-like growth factorsI, IGF1）、胰岛素样生长因子II （insulin-like growth factors II, IGF2）、肌球蛋白重链II a（myosin heavy chain 2a, MHC2a）在出生后不同时期羔羊肱二头肌中的表达规律进行了定量分析。结果显示, IGF1、IGF2和MSTN基因出生后的表达趋势各不相同。其中,IGF-1表达水平最低,MHC2a表达水平最高;IGF2与MSTN表达水平相当; MSTN的表达于7天时表达水平最高,是出生时表达的3倍,随后于14天时急剧下降,于7周时降至最低水平;出生时IGF1的表达水平最高,随后于一周时降至出生时的一半,后期的表达变化不大; IGF2的表达水平于3周时表达最高,是出生时的两倍,在1周时最低。3周后骤然降低,呈现一个波浪型变化;MHC的表达出生时最高,于1周后降至原来的1/7,随后逐渐升高,但变化并不太大。Myostatin基因的表达与IGF1、IGF2、MHC2a基因表达之间无显著相关性,提示Myostatin基因的表达与IGF1、IGF2、MHC2a之间并不存在紧密的调控机制;IGF1与MHC基因表达之间存在显著正相关,表明IGF1与MHC之间存在紧密的相互作用,这种调控机制有待进一步探讨

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一部分 文献综述
• 第一章 肌肉生长抑制素 Myostatin 研究进展
• 1 Myostatin 与双肌性状
• 2 Myostatin 蛋白结构
• 3 Myostatin 基因结构、定位和同源性
• 3.1 Myostatin 基因结构
• 3.2 Myostatin 基因位置
• 3.3 Myostatin 基因同源性
• 4 Myostatin 表达规律
• 5 Myostatin 作用机理
• 5.1 Myostatin 的活化及信号转导
• 5.2 Myostatin 对成肌细胞的作用
• 5.3 Myostatin 对卫星细胞的作用
• 5.4 Myostatin 对脂肪代谢的作用
• 6 国内研究进展
• 第二章 肌肉生长抑制素表达相关基因
• 1 类胰岛素生长因子
• 2 肌球蛋白
• 第二部分 研究论文
• 实验内容 绵羊肱二头肌Myostatin 基因及其相关基因表达定量分析
• 1 实验材料与设备
• 1.1 肌肉样品的采集
• 1.2 试剂
• 1.3 主要仪器设备
• 1.4 溶液及培养基配制
• 2 实验方法
• 2.1 肌肉组织总RNA 提取
• 2.2 逆转录合成cDNA 及纯化
• 2.3 标准曲线的制备
• 2.4 Realtime PCR
• 2.5 统计分析
• 3 实验结果
• 3.1RNA 电泳结果
• 3.2 标准 DNA 片段普通 PCR 产物电泳
• 3.3 酶切质粒电泳
• 3.4 基因测序结果
• 3.5 标准曲线
• 3.6 Realtime PCR 结果
• 3.7 肱二头肌Myostatin 和相关基因表达规律图
• 3.8 肱二头肌Myostatin 和相关基因表达相关性分析
• 4 讨论
• 5 实验总结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介