复杂性疾病维吾尔医异常黑胆质证的代谢组学研究

论文摘要

维吾尔医学作为人类传统医学宝库中的重要成员,在复杂、难治性疾病的防治方面发挥着重要作用。维吾尔医学体液学说是一种说明人体体液的来源、种类及其应用的学说,认为体液是以各种营养物质为原料生成的复杂物质的总成,包括胆液质（sapra hilit）、血液质（kan hilit）、粘液质（belghem hilit）和黑胆质（savda hilit）等四种体液。这四种体液在体内相互转换、补充并不断的循环于整个人体,如果其比例发生变化就会产生异常体液（abnormal hilit）,从而发生病理变化。根据变化的程度、所起的作用及产生的症状、导致的疾病类型等将异常体液质分为异常胆液质（abnormal sapra）、异常血液质（abnormal kan）、异常粘液质（abnormal belghem）和异常黑胆质（abnormal savda）四种类型,尤其是异常黑胆质的出现是体液发生异常变化的主要特征。异常黑胆质型体液与其它异常体液质比较,它的致病性、危险性、恶性程度是最高的,在难治性疾病的发生、发展过程中起主导作用,是导致肿瘤、糖尿病、哮喘等复杂性疾病的主要原因和共同的病理生理学基础。新兴的代谢组学是系统生物学的一个重要组成部分,是通过对机体或细胞内、外所有小分子代谢物的定性定量监测,反映研究对象对环境条件变化或者基因变化所产生的应答,从而揭示生物体整体性代谢变化情况。维医对疾病辨证分型的出发点是机体内在代谢差异的外在表现,这与代谢组学所反映的内容不谋而合。因此代谢组学用于维医药学的研究能够赋予古老的维医药学更加客观、科学的理论依据,更能促进维医药学的现代化和健康发展。本研究以复杂性疾病（肿瘤、糖尿病、哮喘）患者为研究对象,根据维医理论把患者分为不同的证型,用核磁共振波谱技术测定患者血浆代谢物成分及相对含量、阐述不同证型复杂性疾病的体内代谢组学特点,找出与复杂性疾病发生、发展有关的潜在的特异性代谢标志物,从而对复杂性疾病的早期诊断和防治工作提供一定的基础、初步形成能够用于复杂性疾病早期诊断和预后评价的判别体系。材料与方法样本：1.通过体检确定其身体健康的志愿者50例,新疆医科大学附属肿瘤医院诊治的223例异常黑胆质型肿瘤患者,异常黑胆质型患者的体液分型根据维吾尔医学体液分型的分类标准确定。收集患者早餐前空腹血液并离心分离血浆。2.新疆医科大学第一附属医院确诊为Ⅱ型糖尿病的患者共130例；健康志愿者50例。收集患者和志愿者早餐前空腹血液并离心分离血清,保存在-80℃低温冰箱中待测。3.新疆医科大学第一附属医院、新疆医科大学第四附属医院诊断为支气管哮喘的患者,并符合异常黑胆质证标准的患者35例,健康志愿者35例。方法：样品从低温冰箱中取出、解冻并用核磁共振波谱议测定每一个样品的1H-NMR谱。对所有的图谱进行傅立叶变换后进行基线及相位调整并进行分段自动积分。用SIMCA-P+11软件采用正交偏最小二乘判别分析（Orthogonal partial least-squares discriminant analysis,OPLS-DA）法进行分析。结果1.肿瘤：异常黑胆质型肿瘤患者血浆中多种氨基酸显著下降,包括亮氨酸、丙氨酸、瓜氨酸、酪氨酸、组氨酸、甘氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、乙酰半胱氨酸等,与健康人血浆代谢物比较差异性有统计学意义（p<0.05）。此外,糖蛋白、谷氨酰胺、肌醇、鲨肌醇、乳酸、胆碱、肌酸也显著下降,与健康人血浆代谢物比较差异性有统计学意义（p<0.05）。同时,异常黑胆质型肿瘤患者血浆中甲酸、丙酮、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、β-羟丁酸、肉碱、丙二酸以及脂肪分解产物多不饱和脂肪酸、VLDL、LDL等明显增加,与健康人血浆代谢物比较差异性有统计学意义（p<0.05）。α-葡萄糖和β-葡萄糖在两组中没有显著性差异（p>0.05）。异常黑胆质型肿瘤患者体内的脂肪动员和糖酵解水平比非异常黑胆质型肿瘤患者高,免疫功能的损毁可能更严重,其预后可能更差。2.糖尿病：维吾尔医异常黑胆质型Ⅱ型糖尿病患者血清中除了α-葡萄糖和β-葡萄糖含量高于健康人以外,还有极低密度脂蛋白、不饱和脂类、丙酮等脂肪代谢产物也高于健康人,差异有统计学意义（p<0.05）。同时,异常黑胆质型Ⅱ型糖尿病患者血清多种氨基酸含量显著下降,与健康人比较有统计学意义（p<0.05）,这些氨基酸包括异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、谷氨酸、组氨酸、1-甲基组氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸等。除此之外,异常黑胆质型Ⅱ型糖尿病患者血清中与三羧酸循环有关的柠檬酸,与葡萄糖无氧氧化有关的乳酸,与细胞免疫有关的鲨肌醇、肌酸、肌酸酐、糖蛋白等代谢物均降低,与健康人比较有统计学意义（p<0.05）。3.哮喘：异常黑胆质型哮喘患者体内丙酮、乙酰乙酸、肉碱等代谢物含量高于健康人,差异有统计学意义（p<0.05）。异常黑胆质型哮喘患者体内的异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、1-甲基组氨酸等氨基酸含量以及乳酸、糖蛋白、柠檬酸、肌酸、肌酸酐、鲨肌醇等代谢物含量比健康人体内的含量低,差异有统计学意义（p<0.05）。结论本研究以维吾尔医学体液质理论为基础,选择肿瘤、哮喘、糖尿病等复杂性疾病为研究对象,分析异常黑胆质在复杂性疾病发生发展过程中的代谢组学特点,以便对复杂性、难治性疾病的预防和诊治提供一定的基础。本研究发现异常黑胆质证在肿瘤、哮喘、糖尿病等复杂性疾病的发生发展过程中有着相似的代谢组学特点。上述三种复杂性疾病异常黑胆质型体液患者体内均发生脂肪动员增加,肝线粒体脂肪代谢加强,从而不同患者脂肪代谢产物均升高。除了脂肪代谢发生异常以外,本研究还发现异常黑胆质型体液患者体内多种氨基酸含量明显减少,这也是异常黑胆质型体液在引起不同复杂性疾病过程中的共同特点。同时,异常黑胆质型体液会引起机体免疫功能的下降和多种能量代谢的异常。异常黑胆质型体液在引起不同的复杂性疾病过程中均发生能量代谢异常、免疫功能降低等多种生理功能的异常。在比较异常黑胆质型和非异常黑胆质型肿瘤患者血浆代谢物后发现,两者存在明显的代谢组学差异,即异常黑胆质型肿瘤患者发生酸中毒的危险性要比非异常黑胆质型肿瘤患者高,异常黑胆质型肿瘤患者体内的脂肪动员和糖酵解水平比非异常黑胆质型肿瘤患者高、免疫功能的损毁可能更严重、其预后可能更差。这个结果进一步证明了异常黑胆质型体液比其它体液质更危险、致病性更高的理论的准确性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部 肿瘤异常黑胆质证患者血浆代谢组学研究
• 第一章 维吾尔医异常黑胆质型肿瘤患者血浆代谢组学分析
• 1.1 前言
• 1.2 实验部分
• 1.3 实验结果
• 1.4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第二章 维吾尔医异常粘液质、异常胆液质和异常血液质型肿瘤患者血浆代谢组学分析
• 2.1 前言
• 2.2 实验部分
• 2.3 实验结果
• 2.4 讨论
• 小结
• 参考资料
• 第三章 异常黑胆质型与非异常黑胆质型肿瘤患者血浆代谢组学差异分析
• 3.1 前言
• 3.2 实验部分
• 3.3 实验结果
• 3.4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第四章 肿瘤肾虚痰瘀病证患者血浆代谢组学分析
• 4.1 前言
• 4.2 实验部分
• 4.3 实验结果
• 4.4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第五章 基于代谢组学的肿瘤患者维吾尔医异常黑胆质证和中医肾虚痰瘀证的交互性分析
• 5.1 前言
• 5.2 实验部分
• 5.3 实验结果
• 5.4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第二部 维吾尔医不同体液质Ⅱ型糖尿病患者血清代谢组学研究
• 1 前言
• 2 实验部分
• 3 实验结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第三部 哮喘病维吾尔医异常黑胆质证患者血浆代谢组学研究
• 1 前言
• 2 实验部分
• 3 实验结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 结语
• 综述一 代谢组学技术在传统医学研究中的应用与发展
• 参考文献
• 综述二 核磁共振波谱技术在代谢组学中的应用
• 参考文献
• 致谢
• 攻读博士期间发表和完成的论文