论文摘要
Gadd45α是细胞生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45（Gadd45）家族成员之一,在细胞生长抑制、DNA损伤后诱导细胞凋亡及肿瘤抑制中具有重要作用,参与细胞生长的负性调控,瞬时转染Gadd45α可诱导肿瘤细胞发生凋亡,具有维护基因组稳定性的功能。有研究表明：Gadd45α是保护表皮不被紫外线诱导转化的关键因子,对上皮源性肿瘤中的原癌基因起负性调节作用。本课题通过诱导正常角质形成细胞（HaCaT）及人表皮癌细胞株（A431）上调Gadd45α表达及对各细胞生物学行为的影响,初步探讨Gadd45α在皮肤鳞状细胞癌中的作用。1窄谱中波紫外线对HaCaT细胞Gadd45α表达及细胞增殖、凋亡的影响HaCaT细胞分别经100mJ/cm2、200 mJ/cm2、400 mJ/cm2 311nm NB-UVB照射后,应用半定量RT-PCR、western blot法检测发现：HaCaT细胞表达Gadd45α随照射剂量增加,Gadd45αmRNA及蛋白表达升高；不同剂量311nm NB-UVB照射后对HaCaT细胞有抑制作用,其抑制增殖作用呈量效及时效关系；照射后HaCaT细胞周期出现G2期阻滞,并促进细胞凋亡2 HaCaT和A431细胞中Gadd45α表达差异应用RT-PCR、western blot及细胞免疫化学法检测HaCaT和A431细胞Gadd45α表达。结果显示：HaCaT细胞表达Gadd45α,Gadd45α表达在维持HaCaT细胞的增殖和分化中可能有一定作用；A431细胞表达减弱,下调Gadd45α表达可能参与了其恶性生物学行为。3曲古菌素A对A431细胞Gadd45α表达及对细胞增殖、凋亡的影响应用不同浓度曲古菌素A处理A431细胞。结果显示：曲古菌素A对细胞有抑制作用,其抑制增殖作用呈量效及时效关系；不同浓度曲古菌素A处理A431细胞后,细胞周期发生G1期阻滞,细胞凋亡增加；不同浓度曲古菌素A处理后,A431细胞Gadd45αmRNA及蛋白表达升高。Gadd45α可能参与了A431细胞增殖抑制、周期阻滞,并可诱导细胞凋亡。4 Gadd45α蛋白在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达应用免疫组织化学方法检测发现：在高分化皮肤鳞状细胞癌组,Gadd45α蛋白表达阳性表达率较中低分化组表达上调。以上研究结果说明：诱导HaCaT、A431细胞上调Gadd45α表达后均可抑制细胞增殖,Gadd45α可能参与了细胞周期阻滞并促进凋亡；皮肤鳞状细胞癌组织中存在Gadd45α表达异常,Gadd45α可能参与了皮肤鳞状细胞癌的发生过程。
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