论文题目: 天山雪莲与其内生真菌相互作用的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 生药学
作者: 武利勤
导师: 郭顺星
关键词: 天山雪莲,内生真菌,分子鉴定,相互作用,组织培养,细胞悬浮培养,真菌诱导子
文献来源: 中国协和医科大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本文研究了天山雪莲内生真菌及其对宿主的作用，包括内生真菌的分离、培养和分子鉴定、内生真菌对天山雪莲幼苗生长和形态的作用、愈伤组织的诱导培养及内生真菌对愈伤组织的作用、天山雪莲的组培快繁、悬浮培养细胞系的建立和真菌诱导子的作用。 天山雪莲的根段，用10％KOH解离，萃酚兰或酸性品红染色，标本片置光学显微镜下观察，可观察到Dark Septate Endophyte(DSE)真菌的典型结构(细胞内的菌丝和微菌核)和VA菌根菌的典型结构(丛枝，菌丝卷，泡囊)共同存在。 从天山雪莲体内分离出40种内生真菌，其中根中DSE真菌有9种。选择根中的9种DSE真菌和叶中的3种内生真菌在琼脂培养基上和蛭石基质上接种雪莲幼苗，在选择的12种内生真菌中，EF-11、15、27、38、40、41在琼脂培养基上很快吞噬幼苗，其中EF-11、27、40、41真菌在蛭石基质上也很快吞噬幼苗，说明它们可能是雪莲的病原菌；而EF-15、38在蛭石基质上比较温和，且EF-15有明显的促生作用。表明在不同的实验条件下，真菌和宿主的生长状态不同，最终会导致二者之间关系的变化。EF-17、18、32、60在琼脂培养基中生长非常的慢，菌落致密，扩展缓慢，在与雪莲幼苗共培养25d时，对幼苗的生长无影响，但后期抑制幼苗的生长；而在蛭石基质上，这些菌生长的非常快，从而也导致它们对幼苗的作用发生变化。只有EF-37不论在蛭石基质上或琼脂培养基上对雪莲幼苗表现出促进作用，表现为叶柄叶片比对照极大的伸长，根的分支增多，幼苗的干重比对照显著的增加。EF-M真菌在两者培养基上的表现也较一致，在蛭石基质培养基上对幼苗有明显的促生作用。 对其中的两种EF-37、M和叶中分离的真菌EF-15进行分子鉴定，EF-37是Mycocentrospora真菌，EF-M是Leptodontidium属的真菌，而EF-15为Glomerella真菌。其中与EF-M相似性最大的Leptodontidium orchidicola是被描述和研究最多的DSE之一。
论文目录:
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 论文综述
第一章 雪莲的研究进展
第二章 DSE真菌的研究进展
第二部分 内生真菌与天山雪莲幼苗的相互作用
第三章 天山雪莲根中的VA菌根和DSE真菌
第四章 天山雪莲内生真菌及与宿主的相互作用
第一节 天山雪莲内生真菌的分离、培养及DSE真菌的选择
第二节 不同内生真菌对雪莲幼苗生长的作用
第三节 内生真菌的分子鉴定
第四节 不同真菌作用下天山雪莲根的显微结构
第五节 不同真菌作用下天山雪莲根的超微结构
第六节 不同蔗糖浓度下EF-37对雪莲生长的作用
第七节 缺N和蔗糖作用下EF-37对雪莲生长的作用
第八节 EF-37作用下雪莲幼苗的叶绿素荧光学特性
第九节 不同真菌对雪莲幼苗化学成分的影响
第五章 天山雪莲的组培快繁及EF-37在快繁中的作用初探
第三部分 天山雪莲细胞的固体培养
第六章 天山雪莲愈伤组织的诱导和培养
第一节 天山雪莲愈伤组织的诱导和继代培养
第二节 天山雪莲愈伤组织培养条件的优化
第七章 天山雪莲愈伤组织和内生真菌共培养的研究
第四部分 天山雪莲细胞的悬浮培养
第八章 天山雪莲细胞悬浮培养条件的研究
第九章 真菌诱导子对雪莲悬浮细胞生长和总黄酮合成的作用
主要结论
致谢
发布时间: 2006-10-13
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