洛伐他汀和罗格列酮对单核/巨噬源性泡沫细胞ABCA1蛋白的干预

论文摘要

目的:本课题以人白血病单核细胞（human monocytic leukemia cell line ,THP-1）单核/巨噬源性泡沫细胞为研究对象,探讨ABCA1蛋白和载脂蛋白AI（ApoA-I）在胆固醇逆向转运中的作用、药物洛伐他汀、罗格列酮对ABCA1蛋白表达的影响以及ABCA1介导的胆固醇逆向转运对THP-1细胞源性巨噬细胞分化为泡沫细胞过程中炎症因子TNFα、IL-6的影响;以冠心病ACS患者外周血单核细胞为研究对象,探讨药物洛伐他汀、罗格列酮对其ABCA1蛋白表达的影响。方法:1、一次性密度梯度超速离心法分离人血清脂蛋白,获取LDL;用Cu2+（15umol/L）氧化法获得氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）并鉴定。2、培养THP-1细胞。3、160nmol/L的佛波脂（PAM）诱导THP-1细胞成巨噬细胞,巨噬细胞与ox-LDL孵育成泡沫细胞,建立泡沫细胞模型。4、流式细胞技术检测载脂蛋白A-I、洛伐他汀、罗格列酮对THP-1源性泡沫细胞ABCA1蛋白表达的影响。5、洛伐他汀、罗格列酮干预对ABCA1介导的THP-1细胞源性泡沫细胞胆固醇逆向转运过程中TNFα、IL-6分泌的干预（ELISA法）。6、密度梯度法分离冠心病ACS患者外周血单个核细胞,获得单核细胞（PBMC）。7、流式细胞技术检测洛伐他汀和罗格列酮对冠心病ACS患者外周血单核细胞ABCA1蛋白表达的干预。结果:1、洛伐他汀与罗格列酮可使THP-1源性泡沫细胞ABCA1蛋白表达增加。2、ApoA-I组THP-1细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量随ApoA-I浓度和孵育时间呈浓度和时间依赖性降低。3、APOA-I组与ABCA1单克隆抗体预处理+APOA-I组比较,泡沫细胞内胆固醇含量降低,差异有显著性,而ABCA1单克隆抗体预处理+APOA-I组较对照组比较,细胞内胆固醇含量未减少。4、洛伐他汀组（或罗格列酮组）与对照组和ABCA1单克隆抗体预处理+APOA-I组泡沫细胞内胆固醇含量无明显差异,而洛伐他汀（或罗格列酮）+APOA-I组较洛伐他汀组（或罗格列酮组）显著降低,洛伐他汀（或罗格列酮）+APOA-I组较ABCA1单克隆抗体预处理+洛伐他汀（或罗格列酮）+APOA-I组明显降低。5、ox-LDL组（泡沫细胞）TNFα、IL-6分泌较对照组（巨噬细胞）明显增加,ApoA-I+ox-LDL组、洛伐他汀（或罗格列酮）+ ox-LDL组、洛伐他汀（或罗格列酮）+ApoA-I+ox-LDL组TNFα、IL-6分泌较ox-LDL组显著减少,而洛伐他汀（或罗格列酮）+ApoA-I+ox-LDL组较洛伐他汀（或罗格列酮）+ ox-LDL组TNFα、IL-6的分泌进一步降低。6、罗格列酮可使冠心病ACS患者外周血单核细胞ABCA1蛋白表达呈浓度和时间依赖性升高,而洛伐他汀对此未见明显影响。结论:1、APOA-I蛋白使THP-1源性泡沫细胞内胆固醇含量呈浓度和时间依赖性降低,提示APOA-I是介导THP-1源性泡沫细胞RCT的重要蛋白。2、ApoA-I需协同ABCA1蛋白方能介导胆固醇逆向转运。3、泡沫细胞形成过程炎症反应活跃,RCT可抑制炎症反应,洛伐他汀和罗格列酮进一步抑制该炎症反应,推测可能与洛伐他汀和罗格列酮促进RCT有关。4、洛伐他汀可促进THP-1源性泡沫细胞ABCA1蛋白表达,但对ACS患者PBMC ABCA1蛋白表达无明显影响,提示洛伐他汀诱导ABCA1蛋白的表达具有细胞选择性,推测洛伐他汀只能促进THP-1源性泡沫细胞RCT。5、罗格列酮可促进THP-1源性泡沫细胞ABCA1蛋白表达,且对ACS患者PBMC ABCA1蛋白的表达呈浓度和时间依赖性,提示罗格列酮可促进ACS患者RCT,这可能为罗格列酮抗AS机制之一。

论文目录

• 符号说明
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• 1蛋白的干预'>论文正文洛伐他汀和罗格列酮对单核/巨噬源性泡沫细胞ABCA₁蛋白的干预
• 前言
• 第一部分 洛伐他汀和罗格列酮对THP-1单核/巨噬源性泡沫细胞ABCA1蛋白表达的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 参考文献
• 第二部分 洛伐他汀和罗格列酮对ACS 患者外周血单核细胞ABCA1 蛋白表达的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 参考文献
• 全文总结
• 附插图
• 文献综述
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果