论文摘要
目的:检测DPC4、P16及Bcl-2在口腔白斑和口腔鳞癌组织中的表达情况,探讨DPC4、P16及Bcl-2在口腔白斑癌变过程中变化及可能机制,且进一步了解DPC4与P16及Bcl-2的关系,为口腔癌前损害癌变的检测、口腔鳞癌的早期诊断、治疗选择及预后等方面提供参考指标。方法:取口腔白斑26例,口腔鳞癌30例和正常口腔粘膜组织10例。以4%的多聚甲醛固定,石蜡包埋,制成2μm切片,行免疫组织化学（polymer法和SABC法）检测DPC4、P16及Bcl-2蛋白的表达变化,其中每组各10例中取部分组织立即存于液氮或-80℃超低温冰箱用于提取RNA,进一步做荧光实时定量PCR检测组织中DPC4 mRNA的表达。结果:1.DPC4蛋白在10例正常口腔粘膜组织、26例口腔白斑及30例口腔鳞癌组织中表达差异有统计学意义,正常口腔粘膜组织>白斑组织>鳞癌组织（P﹤0.05）。每组各10例中的DPC4 mRNA的表达水平亦有统计学差异,正常口腔粘膜组织>白斑组织>鳞癌组织（P﹤0.05）。SABC法和荧光定量PCR对DPC4检测结果一致性较好（Kappa=0.932>0.75）。2.Bcl-2蛋白在10例正常口腔粘膜组织、26例口腔白斑及30例口腔鳞癌组织中表达差异有统计学意义,正常口腔粘膜组织﹤白斑组织﹤鳞癌组织（P﹤0.05）。3.P16蛋白在10例正常口腔粘膜组织、26例口腔白斑及30例口腔鳞癌组织中表达差异有统计学意义,正常口腔粘膜组织>白斑组织>鳞癌组织（P﹤0.05）。4.DPC4蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈负相关（r = -0.827,P<0.05）;DPC4蛋白表达与P16蛋白表达呈正相关（r = 0.569,P<0.05）。结论:1.DPC4蛋白和DPC4 mRNA的表达强度从正常口腔粘膜组、口腔白斑组到鳞癌组逐渐减弱,提示DPC4基因的缺失可能与口腔粘膜癌变有关。P16蛋白在口腔鳞癌组中的表达少于正常口腔粘膜组及白斑组,提示P16基因表达下降可能参与了口腔鳞癌的发生发展过程。Bcl-2蛋白的表达随着癌变程度增加而增加,表明Bcl-2蛋白的高表达有利于口腔粘膜癌变的发生。2.DPC4蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈负相关,而与P16蛋白表达呈正相关,提示了DPC4基因的缺失表达、P16基因的低表达和Bcl-2基因的过表达三者可能单独或共同参与了口腔白斑癌变过程,可作为口腔白斑癌变检测的指标。3.免疫组化法与荧光定量PCR法具有一致性,由于免疫组化对实验设备要求不高,费用相对较低,可以通过这种方法对目的基因的蛋白表达进行初步检测。
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