PCR-BHEL技术的建立及对血清中丙型肝炎病毒的检测

论文摘要

目的聚合酶链反应偶联印迹杂交和酶联放大技术（PCR-BHEL）的建立并应用该技术检测血液传染性病毒。方法综合聚合酶链反应的高敏感性及印迹杂交和酶联免疫技术的高特异性建立起PCR-BHEL技术,然后应用该技术对酶联免疫吸附实验（ELISA）检测的174例血清标本（其中129例抗-HCV阳性,45例抗-HCV阴性）的HCV RNA进行检测,并将该技术与逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）HCV RNA的检测结果进行比较,以确定该技术在检测血液传染性病毒中的优越性（高特异性、高敏感性）。结果129例抗-HCV阳性标本经PCR-BHEL和RT-PCR检测HCV RNA的检出率分别为78.29%（101/129）和62.02%（80/129）;45例抗-HCV阴性标本经PCR-BHEL和RT-PCR检测HCV RNA的检出率分别为6.67%（3/45）和2.22%（1/45）,两种检测方法的差异有统计学意义（0.01<P<0.05）,即PCR-BHEL对HCV RNA的检出率高于RT-PCR。91例抗-HCV阳性标本经PCR-BHEL和FQ-PCR检测HCV RNA的检出率分别为75.82%（69/91）和62.64%（57/91）;18例抗-HCV阴性标本经PCR-BHEL和FQ-PCR均未检出HCV RNA,两种检测方法的差异无统计学意义（P>0.05）。结论PCR-BHEL较RT-PCR的灵敏度高,能够有效地提高HCV RNA的检出率,可推广应用于其他血液传染性病毒的检测。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 内容与方法
• 1. 材料
• 1.1 血清标本来源
• 1.2 主要试剂及材料
• 1.3 主要仪器
• 1.4 引物及探针的设计与合成
• 1.5 主要生化试剂
• 2. 方法
• 3. 统计学分析
• 结果
• 1.PCR-BHEL 技术的建立
• 2.PCR-BHEL 与 RT-PCR 检测 HCV RNA 结果比较
• 3.PCR-BHEL 与 FQ-PCR 检测 HCV RNA 结果比较
• 4.静脉吸毒人群 PCR-BHEL 与 RT-PCR 检测 HCV RNA 结果比较
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述 丙型肝炎病毒检测技术的研究进展
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表