泰山美味牛肝菌多糖提取纯化及功能研究

论文摘要

本研究以泰山美味牛肝菌为试验材料,首先确定了泰山美味牛肝菌多糖含量的测定方法,并进行了泰山美味牛肝菌多糖提取工艺的参数优化及筛选最佳提取方法,然后将所得的泰山美味牛肝菌多糖进行了分离检测,最后对泰山美味牛肝菌粗多糖的抗氧化和抗疲劳功能进行了研究。主要试验结果如下:1泰山美味牛肝菌中粗多糖含量测定方法的建立。总糖含量的测定采用苯酚-硫酸法,还原糖含量的测定采用3,5-二硝基水杨酸比色法,粗多糖的含量采用总糖与还原糖的差值表示。2泰山美味牛肝菌粗多糖提取工艺的研究。首先通过传统热水法提取泰山美味牛肝菌粗多糖工艺的试验,得出该法最佳工艺为:粉碎度80目,料水比1:40,浸提温度100℃,浸提时间3h,添加3倍乙醇醇沉,提取2次,粗多糖提取得率为4.29 %。微波辅助法提取泰山美味牛肝菌粗多糖工艺的试验,得出该法最佳工艺为:微波处理时间55s ,微波功率640W,料水比1:40,粗多糖得率为5.69%;超声波辅助法提取泰山美味牛肝菌粗多糖工艺的试验,得出该法最佳工艺为:超声波温度50℃,超声波处理时间40min,料水比1:40,粗多糖得率为4.83%。3泰山美味牛肝菌粗多糖的分离纯化。泰山美味牛肝菌粗多糖提取液浓缩后用sevag法除蛋白,再用蒸馏水透析,经醇沉后的泰山美味牛肝菌多糖,冻干后备用。先进行DEAE-52离子交换层析,再做Sephadex G-200凝胶柱层析,然后将所得组分进行理化性质和结构分析。4泰山美味牛肝菌粗多糖的抗氧化和抗疲劳研究。不同浓度泰山美味牛肝菌粗多糖溶液灌胃昆明种小白鼠,灌胃时间持续一个月,测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）指标,结果表明:泰山美味牛肝菌粗多糖有抗氧化功能;测定小白鼠的负重游泳时间及血清中血糖（LG）、尿素氮（BUN）和乳酸脱氢酶（LDH）指标,结果表明:泰山美味牛肝菌粗多糖有抗疲劳功能。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 引言
• 1.1 多糖的生物活性
• 1.1.1 抗肿瘤活性
• 1.1.2 抗病毒活性
• 1.1.3 抗衰老活性
• 1.2 多糖的分离纯化和结构分析概述
• 1.2.1 多糖的分离纯化
• 1.2.2 多糖链的结构研究
• 1.3 多糖的结构和活性的关系
• 1.3.1 一级结构与活性的关系
• 1.3.2 分子量与活性的关系
• 1.3.3 高级结构与活性的关系
• 1.3.4 具有生物活性的食药用菌多糖的结构和保健功能
• 1.4 多糖的结构修饰
• 1.4.1 化学修饰
• 1.4.2 生物方法修饰
• 1.4.3 物理方法修饰
• 1.5 真菌多糖类产品开发现状
• 1.6 目前多糖研究中存在的问题
• 1.6.1 多糖结构和功能的关系至今尚不十分清楚
• 1.6.2 多糖的结构测定方法远未达到像蛋白质和核酸结构测定那样自动化、微量化和标准化
• 1.6.3 多糖的合成远比多肽、核酸的合成复杂、困难
• 1.6.4 多糖在体内的作用机制还未十分明了
• 1.6.5 多糖样品的制取较为困难
• 1.7 美味牛肝菌多糖及其研究进展
• 1.7.1 美味牛肝菌及美味牛肝菌多糖简介
• 1.7.2 美味牛肝菌多糖国内外研究概况
• 1.8 本项目的研究意义及研究内容
• 1.8.1 研究意义
• 1.8.2 主要研究内容
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 主要试剂
• 2.3 主要仪器与设备
• 2.4 技术路线
• 2.5 实验方法
• 2.5.1 泰山美味牛肝菌多糖含量的测定方法
• 2.5.2 泰山美味牛肝菌多糖提取工艺的研究
• 2.5.3 泰山美味牛肝菌多糖的分离纯化
• 2.5.4 泰山美味牛肝菌多糖的抗氧化和抗疲劳功能研究
• 3 结果与分析
• 3.1 泰山美味牛肝菌多糖测定方法的确立
• 3.1.1 总糖含量的测定：苯酚－硫酸法
• 3.1.2 还原糖含量的测定：3,5－二硝基水杨酸法
• 3.2 泰山美味牛肝菌粗多糖提取工艺的研究
• 3.2.1 传统热水法提取泰山美味牛肝菌多糖的工艺
• 3.2.2 微波辅助法提取泰山美味牛肝菌多糖的工艺
• 3.2.3 超声波辅助法提取泰山美味牛肝菌多糖的工艺
• 3.3 泰山美味牛肝菌多糖的分离纯化
• 3.3.1 DEAE-52 离子交换柱层析
• 3.3.2 葡聚糖凝胶Sephadex-G 200 柱层析
• 3.3.3 多糖纯化样品的紫外光谱分析
• 3.3.4 多糖纯化样品的红外光谱分析
• 3.3.5 液质联用方法检测（LC-MS）
• 3.4 泰山美味牛肝菌粗多糖的抗氧化和抗疲劳研究
• 3.4.1 泰山美味牛肝菌粗多糖抗氧化功能的研究
• 3.4.2 泰山美味牛肝菌粗多糖抗疲劳功能的研究
• 4 讨论
• 4.1 超声波温度和时间的选择
• 4.2 脂肪对多糖提取的影响
• 4.3 创新点
• 4.4 进一步研究方向
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表论文情况