论文摘要
目前超微粉碎技术在食品加工中的优势日益明显,得到广泛应用;富硒绿茶具有显著的抗氧化、抗肿瘤作用。基于此,本文以绿茶作载体,按国家发明专利ZL03112724.Ⅹ:一种富硒茶叶的生产调节剂及其用法实施,制备富硒绿茶,采用物理粉碎方法,制备出不同粒径的超微绿茶,通过动物模型研究其急性毒性,并通过形态观察和成分分析、体外吸附胆固醇试验、体外抗氧化试验和抗肿瘤细胞增殖试验,研究了粒径的变化对富硒绿茶的理化特性、生物活性的影响。结果如下:采用球磨法二次粉碎,制备出平均粒径3.52μm的超微普通绿茶Ⅰ(mRGT)、超微富硒绿茶Ⅰ(mSeGT)和平均粒径220 nm的超微普通绿茶Ⅱ(nRGT)、超微富硒绿茶Ⅱ(nSeGT);通过透射电镜观察其形态呈不规则细小碎片。超微绿茶的成分受到硒和粒径效应的共同影响。富硒能提高绿茶茶多酚、氨基酸、维生素C的含量;粒径减小在增加成分的溶出率的同时又加速了不稳定成分的氧化破坏。急性毒性试验证明各超微绿茶的LD50均大于21.5 g/kg·bw,为无毒物质。体外吸附胆固醇试验表明,随着粒径的减小吸附效应增大,nSeGT吸附清除胆固醇的能力显著高于其他处理组。采用DPPH和AAPH两种抗氧化体系评价不同粒径富硒绿茶和普通绿茶的抗氧化活性,发现:硒含量增加能够显著提高超微绿茶清除自由基和抑制脂质过氧化的活性;粒径由3.52μm减小到220 nm后,DPPH自由基的清除率分别由38.15±0.05%(mRGT)提高到67.87±0.88%(nRGT),45.79±0.63%(mSeGT)提高到69.49±0.54%(nSeGT);但抑制脂质过氧化的活性却呈降低趋势:mSeGT>mRGT=nSeGT>control>nRGT,nRGT还表现出了促进亚油酸氧化的作用。抑制肿瘤细胞增殖作用结果表明,硒提高超微绿茶抗肿瘤活性对肿瘤细胞具有选择性,富硒后对HepG2细胞、A549细胞抑制率增加,而对MGc803细胞抑制率降低。粒径由3.52μm减小到220 nm,能够显著提高超微绿茶的抗肿瘤活性,在100μg mL-1剂量下,nRGT对HepG2、A549、MGC803三种肿瘤细胞增殖抑制率分别是77.35±5.45%,80.76±0.67%,87.54±1.34%;nSeGT的抑制率分别是82.51±4.41%,88.09±2.19%,74.48±3.11%,均显著高于nRGT和mSeGT以及阳性对照5-Fu。
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