论文摘要
创伤是一个重要的疾病,在我国每年因创伤致伤数百万,更让人担忧的是,专家们预测,进入21世纪以后,创伤人数可能成倍地增长。为此,如何加快创伤后组织修复是临床上的一个重要问题,也是提高损伤康复后生活质量的需要。虽然,目前人们研究并发现了许多具有促增殖、抗凋亡的促修复因子,其中最有代表性的是生长因子（bFGF、KGF等）,但是,由于这些因子中有的受到创面受体表达缺乏、变异、蛋白酶浓度升高及生长因子比例失衡等因素的影响,难以达到理想的促愈效果,有的甚至有增加瘢痕形成的副作用,使这些因子的应用受到很大的限制。因此,探讨正常创伤愈合的机制,寻求新的非受体作用途径的促增殖剂,对促进创伤愈合尤其是放创复合伤、大面积创伤、烧伤等难愈伤口有着十分重要的意义。c-ski是鸟类病毒癌基因v-ski的细胞内同源物,在不同类型的组织和细胞中分布广泛。过量表达的ski可促进鸡胚成纤维细胞增殖,诱导其肌肉分化。c-ski可以抑制Smad3、Smad2活性,还可调节多种核因子的转录活性,如促进NFI（促核因子I）的转录而抑制癌基因Rb的转录,参与神经系统发育、造血细胞的增殖和分化、肿瘤发生、组织再生等多种生理病理过程。在创伤愈合方面c-ski有无作用呢?1999美国NIH小组首次报道,Smad3基因敲除小鼠的伤口愈合速率增加了2倍,这一结果证实了抑制Smad3具有促愈作用;同时,近些年研究表明TGF-beta信号系统是导致瘢痕形成的重要原因,而Smad3和Smad2做为TGF-beta途径重要的信号因子,在瘢痕形成中具有重要作用,因此,抑制Smad3和Smad2成为了减轻瘢痕形成的新途径。这些都提示c-ski基因作为Smad3、Smad2的辅阻遏子,其可能在伤口愈合、瘢痕形成和放创复合伤愈合方面具有作用,但到目前为止尚未见有直接证据报道。为此,本课题首先采用体外细胞基因转染技术来明确c-ski对成纤维细胞增殖及胶原分泌的作用,其次利用pcDNA3.0裸质粒局部皮下注射来建立创伤愈合转基因治疗动物模型并评价其应用价值。在此基础上,进一步对c-ski在创伤愈合中的作用进行以下两个方面探讨:（1） c-ski转基因治疗促进大鼠皮肤伤口愈合的作用;（2） c-ski转基因治疗减轻大鼠愈后瘢痕和兔耳增生性瘢痕形成的效果,得到的主要结果与结论如下:1.体外细胞实验显示转c-ski基因显著促进成纤维细胞增殖,且具有剂量依赖性;