谭彬:桃SERK2的克隆及其在不同状态愈伤组织中的表达分析论文

谭彬:桃SERK2的克隆及其在不同状态愈伤组织中的表达分析论文

本文主要研究内容

作者谭彬,陈谭星,韩亚萍,张亚如,郑先波,程钧,王伟,冯建灿(2019)在《桃SERK2的克隆及其在不同状态愈伤组织中的表达分析》一文中研究指出:【目的】分离克隆桃(Prunus persica L.)体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶(somatic embryogenesis receptor-like kinases,SERKs)基因SERK2,检测其在不同状态桃愈伤组织中的表达差异,分析SERK2与胚性愈伤组织发生的关系,为揭示组织培养困难树种桃胚性愈伤组织产生的分子机理奠定基础。【方法】采用同源克隆法获得PpSERK2的cDNA全长序列,运用TMPred、DNAMAN和MEGA 5.0等生物信息学软件对序列进行分析;以‘秋蜜红’花药为外植体,接种至添加2.0 mg·L-1 6-BA和1.0 mg·L-1 2,4-D的NN69培养基诱导愈伤组织;将获得的不同状态愈伤组织制作石蜡切片并进行组织细胞学观察;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对PpSERK2在4种不同状态愈伤组织中的表达进行分析。【结果】克隆获得‘秋蜜红’PpSERK2的cDNA全长序列1 881 bp,编码626个氨基酸,其蛋白质理论分子量为68.99 kD,理论等电点为5.38,具有完整的SERK蛋白的保守结构域,与牡丹(Paeonia suffruticosa)等物种的同源性为67.88%—92.71%,且与秘鲁番茄(Solanum peruvianu)和温州蜜柑(Citrus unshiu)的相似性最高。在与其他物种的SERK蛋白构建的系统进化树中,PpSERK2与SpSERK1、CitSERK1和PsSERK2等聚在一起,与同源性比对结果一致。以‘秋蜜红’花药为外植体诱导获得4种不同状态的愈伤组织,组织细胞学观察发现黄色疏松状(球形胚出现)、绿色紧实状(心形胚出现)和浅黄色透明状(尚未完全形成的鱼雷形胚结构出现)的3种状态的愈伤组织细胞小、排列紧密;而黄白色水渍状愈伤组织细胞体积大、排列不规则,细胞质稀且染色浅。根据形态学和组织学的鉴定结果,可知黄色疏松状、绿色紧实状和浅黄色透明状的3种状态的愈伤组织均为胚性愈伤组织,而黄白色水渍状愈伤组织为非胚性愈伤组织。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明,PpSERK2在‘秋蜜红’3种状态的胚性愈伤组织中的表达量显著高于非胚性愈伤组织,且在3种胚性愈伤组织中的表达量有差异,其中在黄色疏松状愈伤组织中表达量最高,绿色紧实状次之,浅黄色透明状中最低。【结论】克隆获得PpSERK2的cDNA全长序列,其在3种状态的胚性愈伤组织中的表达量明显高于非胚性愈伤组织,且在黄色疏松状胚性愈伤组织中的表达量最高,PpSERK2在桃体细胞胚发育的早期发挥作用。

Abstract

【mu de 】fen li ke long tao (Prunus persica L.)ti xi bao pei tai fa sheng xiang guan lei shou ti dan bai ji mei (somatic embryogenesis receptor-like kinases,SERKs)ji yin SERK2,jian ce ji zai bu tong zhuang tai tao yu shang zu zhi zhong de biao da cha yi ,fen xi SERK2yu pei xing yu shang zu zhi fa sheng de guan ji ,wei jie shi zu zhi pei yang kun nan shu chong tao pei xing yu shang zu zhi chan sheng de fen zi ji li dian ding ji chu 。【fang fa 】cai yong tong yuan ke long fa huo de PpSERK2de cDNAquan chang xu lie ,yun yong TMPred、DNAMANhe MEGA 5.0deng sheng wu xin xi xue ruan jian dui xu lie jin hang fen xi ;yi ‘qiu mi gong ’hua yao wei wai zhi ti ,jie chong zhi tian jia 2.0 mg·L-1 6-BAhe 1.0 mg·L-1 2,4-Dde NN69pei yang ji you dao yu shang zu zhi ;jiang huo de de bu tong zhuang tai yu shang zu zhi zhi zuo dan la qie pian bing jin hang zu zhi xi bao xue guan cha ;tong guo shi shi ying guang ding liang PCR(qRT-PCR)dui PpSERK2zai 4chong bu tong zhuang tai yu shang zu zhi zhong de biao da jin hang fen xi 。【jie guo 】ke long huo de ‘qiu mi gong ’PpSERK2de cDNAquan chang xu lie 1 881 bp,bian ma 626ge an ji suan ,ji dan bai zhi li lun fen zi liang wei 68.99 kD,li lun deng dian dian wei 5.38,ju you wan zheng de SERKdan bai de bao shou jie gou yu ,yu mu dan (Paeonia suffruticosa)deng wu chong de tong yuan xing wei 67.88%—92.71%,ju yu bi lu fan jia (Solanum peruvianu)he wen zhou mi gan (Citrus unshiu)de xiang shi xing zui gao 。zai yu ji ta wu chong de SERKdan bai gou jian de ji tong jin hua shu zhong ,PpSERK2yu SpSERK1、CitSERK1he PsSERK2deng ju zai yi qi ,yu tong yuan xing bi dui jie guo yi zhi 。yi ‘qiu mi gong ’hua yao wei wai zhi ti you dao huo de 4chong bu tong zhuang tai de yu shang zu zhi ,zu zhi xi bao xue guan cha fa xian huang se shu song zhuang (qiu xing pei chu xian )、lu se jin shi zhuang (xin xing pei chu xian )he jian huang se tou ming zhuang (shang wei wan quan xing cheng de yu lei xing pei jie gou chu xian )de 3chong zhuang tai de yu shang zu zhi xi bao xiao 、pai lie jin mi ;er huang bai se shui zi zhuang yu shang zu zhi xi bao ti ji da 、pai lie bu gui ze ,xi bao zhi xi ju ran se jian 。gen ju xing tai xue he zu zhi xue de jian ding jie guo ,ke zhi huang se shu song zhuang 、lu se jin shi zhuang he jian huang se tou ming zhuang de 3chong zhuang tai de yu shang zu zhi jun wei pei xing yu shang zu zhi ,er huang bai se shui zi zhuang yu shang zu zhi wei fei pei xing yu shang zu zhi 。shi shi ying guang ding liang PCR(qRT-PCR)jie guo biao ming ,PpSERK2zai ‘qiu mi gong ’3chong zhuang tai de pei xing yu shang zu zhi zhong de biao da liang xian zhe gao yu fei pei xing yu shang zu zhi ,ju zai 3chong pei xing yu shang zu zhi zhong de biao da liang you cha yi ,ji zhong zai huang se shu song zhuang yu shang zu zhi zhong biao da liang zui gao ,lu se jin shi zhuang ci zhi ,jian huang se tou ming zhuang zhong zui di 。【jie lun 】ke long huo de PpSERK2de cDNAquan chang xu lie ,ji zai 3chong zhuang tai de pei xing yu shang zu zhi zhong de biao da liang ming xian gao yu fei pei xing yu shang zu zhi ,ju zai huang se shu song zhuang pei xing yu shang zu zhi zhong de biao da liang zui gao ,PpSERK2zai tao ti xi bao pei fa yo de zao ji fa hui zuo yong 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国农业科学的谭彬,陈谭星,韩亚萍,张亚如,郑先波,程钧,王伟,冯建灿,发表于刊物中国农业科学2019年05期论文,是一篇关于体细胞胚发生论文,胚性愈伤组织论文,中国农业科学2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国农业科学2019年05期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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