多功能壳聚糖季铵盐载药微球的制备

论文摘要

本文通过羧甲基壳聚糖接枝二甲基十八烷基环氧丙基氯化铵,合成水油两溶性的羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐（OQCMC）。产物的结构通过傅立叶变换红外吸收光谱（FT-IR）、1H核磁共振谱（1H-NMR）和X射线衍射分析（XRD）进行了表征。以合成的羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐为表面活性剂,用微乳液方法制备了载药微球,经TEM、激光粒度仪及Zeta电位仪对所制样品进行表征,得出了水溶性药物长春新碱、油溶性药物消炎痛及二者共载的最大载药率。结果表示:载药微球在水中有较好的稳定性,粒径较小,约为20nm,Zeta电位可达39.36mV;对长春新碱的最大载药率为22.7%,对消炎痛的最大载药率为20.1%,二者共载时,长春新碱的最大载药率为12.2%,消炎痛为10.0%;三者在PBS（pH=7.4）缓冲溶液中具有很好的缓控释功能。用合成的羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐代替合成磷脂同胆固醇制备阳离子高分子类脂质体（CPL）。利用阳离子高分子脂质体包覆油溶性Fe3O4纳米颗粒,构建磁性阳离子高分子（MCPL）体系。用TEM、VSM及Zeta电位仪对所制样品进行表征。结果表示:磁性阳离子高分子脂质体在水相中可以稳定存在,粒径可达20nm,分散性较好,Zeta电位可达41.20mV,比饱和磁化强度为39.96 emu/g,具有超顺磁性;MCPL对药物消炎痛的包封率可以达到83%,并且在PBS（pH=7.4）缓冲溶液中具有很好的缓控释功能。将磁性阳离子高分子脂质体与抑癌基因WTp53结合,构建出靶向纳米载体投递系统。利用TEM、凝胶阻滞实验、沉淀实验和体外释放实验对系统进行了评价。结果表示:该投递系统粒径均匀,约为50nm;具有较强的分散稳定性;在中性条件下,质量比为1∶0.6时,质粒与载体的结合效率可达到近100﹪,而在酸性或碱性条件下,p53质粒DNA的结合效率稍有下降;经DNaseⅠ酶切保护实验显示载体粒子在合适比例下对DNA有良好的保护作用,使其不被DNaseⅠ降解;投递系统的体外释放时间平稳维持9天以上。这为代替病毒载体对冠状动脉旁路移植术后移植静脉再狭窄进行基因治疗奠定了基础。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 引言
• 1.2 纳米技术与纳米材料
• 1.3 纳米载药系统
• 1.4 纳米载药微球和微囊体系
• 1.5 纳米载药微粒的制备材料
• 1.6 纳米微球、微囊制备方法
• 1.6.1 乳化-固化法
• 1.6.2 单凝聚法
• 1.6.3 复凝聚法
• 1.6.4 喷雾干燥法
• 1.6.5 自乳化-固化法
• 1.7 基因治疗和基因载体
• 1.7.1 基因治疗
• 1.7.2 基因载体
• 1.8 本课题的研究意义和内容
• 第二章 羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐的制备及表征
• 2.1 引言
• 2.1.1 壳聚糖
• 2.1.2 羧甲基壳聚糖
• 2.1.3 壳聚糖的季铵化衍生物
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 实验仪器和药品
• 2.2.2 实验方法
• 2.2.3 表征与性能测试方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 壳聚糖衍生物的合成
• 2.3.2 红外吸收光谱分析
• 2.3.3 X 射线衍射分析
• 2.3.4 双亲性高分子的液体核磁共振谱
• 2.3.5 Zeta 电位
• 2.4 本章小结
• 第三章 微乳液体系作为药物载体的初步研究
• 3.1 引言
• 3.1.1 微乳液
• 3.1.2 高分子微乳液
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 实验仪器与药品
• 3.2.2 实验过程
• 3.2.3 表征与性能测试
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 最佳微乳形成条件的探讨
• 3.3.2 拟三元相图
• 3.3.3 表征及性能测试
• 3.3.4 载药微球的性能研究
• 3.4 本章小结
• 第四章 磁性阳离子高分子脂质体的制备及性能研究
• 4.1 引言
• 4.1.1 脂质体
• 4.1.2 阳离子脂质体
• 4.1.3 磁性脂质体
• 4.1.4 阳离子高分子脂质体
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 实验仪器与药品
• 4.2.2 实验过程
• 4.2.3 阳离子高分子类脂质体性能研究与表征
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 阳离子高分子脂质体的制备
• 4.3.2 长春新碱阳离子高分子脂质体的洗脱曲线
• 4.3.3 磁性阳离子高分子脂质体的制备
• 4.3.4 表征及性能测试
• 4.4 本章小结
• 第五章 磁性阳离子高分子脂质体的应用
• 5.1 引言
• 5.2 实验部分
• 5.2.1 实验仪器和药品
• 5.2.2 实验方法
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 靶向纳米载体投递系统形貌
• 5.3.2 DNA 结合实验
• 5.3.3 DNaseⅠ酶切保护实验
• 5.3.4 DNA 沉淀实验
• 5.3.5 靶向纳米载体投递系统的体外释放实验
• 5.4 本章小结
• 全文结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 致谢