饲料中维吉尼亚霉素含量测定方法的研究

论文摘要

维吉尼亚霉素是抗生素的一种,在我国是一种允许使用的药物饲料添加剂。维吉尼亚霉素添加在饲料中有显著的促进动物生长、提高饲料效率的作用。但是出于交叉耐药性的考虑,欧盟从1999年起已经禁止在饲料中使用维吉尼亚霉素。因此,研究建立一种饲料中维吉尼亚霉素的测定方法,对于监控维吉尼亚霉素的合理合法使用,规范饲料生产企业和养殖户药物添加剂使用行为,具有很重要的现实意义。本研究建立了一种利用高效液相色谱来测定饲料中维吉尼亚霉素含量的方法。饲料中的维吉尼亚霉素用20mL乙酸乙酯超声提取,离心,取10mL上层清液与5g无水硫酸钠和10mL正己烷混合,离心,上清液通过硅胶柱和HLB柱净化,用5mL甲醇洗脱,洗脱液于50℃氮吹仪上蒸发至干,残渣用0.5～5mL流动相溶解残渣,过0.45μm微孔滤膜后上机测定,外标法定量。本方法的检测限和定量限分别为0.5mg/kg和2mg/kg；标准样品在2μg/mL～500μg/mL的范围内线性关系良好,相关系数R2>0.999；配合饲料在2mg/kg、10mg/kg和50mg/kg三个添加浓度的平均回收率为84.77%～95.75%,批内RSD为2.35%～6.41%、批间RSD为4.01%～4.32%；浓缩饲料在5mg/kg、100mg/kg和500mg/kg三个添加浓度的平均回收率为83.82%～96.34%,批内RSD为2.38%～7.43%、批间RSD为3.62%～4.98%；预混饲料在25mg/kg、250mg/kg和1000mg/kg三个添加浓度的平均回收率为88.01%～97.70%,批内RSD为2.31%-5.48%%、批间RSD为2.67%～3.64%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 第一章 文献综述
• 1 维吉尼亚霉素简介
• 2 维吉尼亚霉素生理作用
• 2.1 提高动物生产性能，促进动物生长，提高饲料利用率
• 2.2 抑制病原菌的生长，防治肝脓肿
• 2.3 促进营养物质的吸收，改善饲养环境
• 3 维吉尼亚霉素检测研究方法现状
• 3.1 饲料中药物的检测方法
• 3.2 维吉尼亚霉素的检测方法研究进展
• 4 结论与展望
• 第二章 试验研究
• 试验一 高效液相色谱法与微生物检定法测定维吉尼亚霉素含量的对比试验
• 1 试剂与材料
• 2 仪器与设备
• 3 试验方法
• 3.1 高效液相色谱法
• 3.2 微生物检定法
• 4 结果与分析
• 4.1 高效液相色谱法测定维吉尼亚霉素组分结果
• 4.2 维吉尼亚霉素含量测定结果
• 5 结论
• 试验二 饲料中维吉尼亚霉素测定方法条件筛选试验
• 1 试剂与材料
• 2 仪器与设备
• 3 试验方法
• 3.1 检测波长的筛选
• 3.2 流动相的筛选
• 3.3 提取溶剂的筛选
• 3.4 固相萃取小柱的筛选
• 4 结果与讨论
• 4.1 测定波长的确定
• 4.2 色谱柱的选择
• 4.3 流动相的选择
• 4.4 提取液的选择
• 4.5 净化条件的确定
• 5 结论
• 试验三 饲料中维吉尼亚霉素含量测定方法验证试验
• 1 试剂和材料
• 2 仪器和设备
• 3 试验
• 3.1 提取
• 3.2 净化
• 3.3 色谱条件
• 3.4 定量测定
• 4 结果与分析
• 4.1 线性范围评价
• 4.2 回收率试验
• 4.3 精密度结果
• 4.4 检测限与定量限
• 5 结论
• 全文结论
• 参考文献
• 致谢