论文摘要
目的:探讨单独应用Ag85A DNA疫苗和Ag85B DNA疫苗对大鼠原位膀胱肿瘤的免疫治疗效果。方法:致癌剂N-甲基亚硝基脲（methyl nitrosourea,MNU）膀胱灌注雌性Wistar大鼠制备膀胱肿瘤模型。将建模成功40只大鼠随机分为生理盐水组、空白质粒组、卡介苗组、Ag85A DNA疫苗组和Ag85B DNA疫苗组,各8只,建模后第7、14、21天于大鼠右后肢肌肉注射给药。第28天处死大鼠,流式细胞仪检测各组大鼠脾脏的CD4+和CD8+ T细胞亚群数量及所占百分比并计算CD4+/CD8+比值;ELISA法检测大鼠血清中IFN-γ分泌水平;剥离膀胱肿瘤进行组织病理学检查。结果:1.经双酶切鉴定,成功提取重组质粒pcDNA-Ag85A及pcDNA-Ag85B。2.成功建立大鼠膀胱癌模型,致瘤率100%。3.经疫苗治疗后,Ag85A DNA疫苗组和Ag85B DNA疫苗组膀胱肿瘤体积均有所减小、病理分级也有所减轻,且Ag85B DNA疫苗组效果强于Ag85A DNA疫苗组,但效果不及卡介苗组。4.与生理盐水、空白质粒组相比,Ag85A DNA疫苗组和Ag85B DNA疫苗组能够显著提高CD4+和CD8+ T细胞亚群的数量及CD4+/CD8+的比值,且Ag85B DNA疫苗组各项指标均高于Ag85A DNA疫苗组,差别有统计学意义（P<0.05）,但均低于卡介苗组,差别有统计学意义（P<0.01）。5.与生理盐水组、空白质粒组相比,Ag85A DNA疫苗和Ag85B DNA疫苗均能够促进大鼠外周血清中IFN-γ的分泌,且Ag85B DNA疫苗组血清IFN-γ含量高于Ag85A DNA疫苗组,差别有统计学意义（P<0.01）,但二者均低于卡介苗组,差别有统计学意义（P<0.01）。结论:1.单独应用Ag85A和Ag85B DNA疫苗均可以提高膀胱肿瘤大鼠的免疫功能,但尚达不到BCG的抗膀胱肿瘤免疫效果。2.Ag85B DNA疫苗的抗膀胱肿瘤免疫效果强于Ag85A DNA疫苗。
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