嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤的基础研究

嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤的基础研究

论文题目: 嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤的基础研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 外科学

作者: 魏开斌

导师: 汤继文

关键词: 嗅粘膜,嗅球,嗅鞘细胞,原代细胞培养,鉴定,脊髓损伤,细胞移植,嗅鞘细胞培养上清,胶质源性神经生长因子含量,嗅球细胞悬液,嗅球组织块,嗅球源性嗅鞘细胞,嗅粘膜源性嗅鞘细胞,甲基强地松龙,协同作用

文献来源: 山东大学

发表年度: 2005

论文摘要: 脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是临床上常见病多发病,严重的脊髓损伤多发生在青壮年,并且在我国有逐年增加的趋势。尤其是严重的脊髓损伤,致残率很高,严重危及人类的健康,对个人和社会都造成了极大的损失,成为影响人类寿命的重要因素之一。脊髓损伤的治疗没有有效的方法。目前治疗的策略主要局限于预防和减少继发损伤及有助于神经恢复或再生的干预调节。近年来,由于分子生物学技术的迅速发展,脊髓损伤的治疗有了突飞猛进的发展,揭开了治疗脊髓损伤新的一页。实验表明胚胎脊髓移植、细胞移植(干细胞)移植、转基因细胞移植、基因治疗等使脊髓功能得到了部分恢复,为脊髓损伤的治疗提供了新的治疗方法。尤其是嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤在实验和临床应用中获得了初步成功,为脊髓损伤的康复带来了曙光,成为有望解决脊髓损伤这一临床世纪难题的重要方法之一! 本研究在以下几个方面系统地对嗅鞘细胞移植相关问题进行了研究。通过对嗅球嗅鞘细胞特别是嗅粘膜嗅鞘细胞的分离培养纯化鉴定,对嗅鞘细胞的形态学,生长规律进行了研究,并对它们的培养上清不同时间的胶质源性神经生长因子(GDNF)含量进行了研究,试图了解两种嗅鞘细胞形态学、功能及嗅粘膜嗅鞘细胞培养扩增移植修复脊髓损伤的可能性。我们还对嗅球组织块、嗅球细胞悬液、嗅粘膜组织块、嗅球及嗅粘膜嗅鞘细胞髓内移植及联合应用甲基强地松龙修复脊髓损伤进行了动物实验,观察嗅鞘细胞在脊髓损伤修复中的作用及与甲基强地松龙的相互作用,为嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床应用提供理论依据。 第一部分:嗅鞘细胞培养 一、成年大鼠嗅球成鞘细胞的原代培养及形态学研究 目的 探讨大鼠嗅球成鞘细胞(Olfactory ensheathing cells,OECs)分离

论文目录:

中文摘要

英文摘要

主要英文缩写表

前言

第一部分 嗅鞘细胞的培养与鉴定

一、成年大鼠嗅球源性嗅鞘细胞的分离、培养、纯化及鉴定

实验材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

二、成年大鼠嗅粘膜源性嗅鞘细胞分离培养及形态学研究

实验材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分

嗅鞘细胞培养上清胶质源性神经生长因子(GDNF)含量的测定

实验材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

第三部分

嗅球源性嗅鞘细胞移植联合应用大剂量甲基强的松龙修复急性脊髓损伤

实验材料

方法

结果

讨论

结论

参考文献

第四部分

嗅球细胞悬液与嗅球组织块髓内移植修复急性脊髓损伤

实验材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

第五部分

嗅粘膜移植联合应用大剂量甲基强地松龙修复急性脊髓损伤

实验材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

第六部分

嗅粘膜源性嗅鞘细胞移植修复急性脊髓损伤

实验材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

第七部分 总结

附录

一、改良的 Glees和 Maesland嗜银染色法

二、培养细胞的免疫组织化学染色

三、石蜡切片免疫组化(P75染色即用型 SABC)具体方法

四、HRP逆行示踪大脑皮层后肢区及中脑红核的 TMB染色方法

五、改良CBS(Combined Behavioral Score)计分表

致谢

博士在读期间发表文章

学位论文评阅及答辩情况表

发布时间: 2005-10-17

参考文献

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