注射用蟾皮总碱抗肿瘤有效性和安全性研究

论文摘要

注射用蟾皮总碱为蟾皮提取液的冻干粉针剂型,是中华大蟾蜍阴干全皮提取精制而成的无菌粉针,具有清热解毒、消肿、止痛、提高机体免疫力等功效。本课题创新性的提出了一种新的吲哚类生物碱提取工艺,使提取物中吲哚类生物碱的含量达到90%以上,并按国家一类新药的标准进行了成药性研究--药效学、一般药理学、毒理学研究。并制定了注射用蟾皮总碱的质量标准,为注射用蟾皮总碱的临床实验建立了理论基础。实验结果表明:注射用蟾皮总碱的生产和制备工艺稳定,适合大规模工业化生产。不同浓度注射用蟾皮总碱对人肿瘤细胞增殖呈现出不同程度的抑制作用,浓度为0.4352 ug/ml的注射用蟾皮总碱对人胃癌细胞SGC-7901、人肝癌细胞SMMC-7721和人宫颈癌细胞Hela的抑制率分别为41.41%、62.41%、80.53%,均高于同剂量的华蟾素注射液组的肿瘤抑制率。注射用蟾皮总碱急性毒性实验检测不到明显的急性毒性反应。长期毒性实验结果显示,高剂量、长时间（170 ug/kg、连续三个月）给药后大鼠血液学检查肾脏尿素氮含量为9.94mmol/L,较正常值明显升高,恢复期一个月时尿素氮含量恢复正常。肾脏病理学检查在三个月时表现为肾小管细胞肿胀、变形、境界模糊,胞核消失,细胞坏死。恢复期一个月时肾脏病理学检查已恢复正常。Beagle犬连续高剂量、长时间（52ug/kg、连续三个月）给药后,血液学检查尿素氮含量为5.54mmol/L ,尿常规检查尿液pH值为5.13、尿维生素C含量为0.75mmol/L,尿沉渣镜检（x400）可见7-9个红细胞,与对照组比较,差异明显;病理学检查显示给药三个月时犬肾小管细胞形状不规则,单位面积细胞数量减少,部分胞体皱缩,胞浆透亮度下降,细胞变圆。恢复期1个月后病理检查恢复正常。实验表明注射用蟾皮总碱较大剂量连续用药3个月对大鼠及Beagle犬肾脏功能有影响,恢复期1个月肾脏各项指标恢复正常。各项实验证明,采用新工艺提取的注射用蟾皮总碱质量工艺稳定,药效显著,无明显及长期毒副作用,可进行临床试用。

论文目录

• 提要
• 第1章 绪论
• 1.1 立题依据及实验设计路线
• 1.2 综述
• 1.2.1 蟾皮制剂抗肿瘤作用机理
• 1.2.2 蟾皮制剂临床应用现状
• 第2章 注射用蟾皮总碱的制备工艺
• 第3章 注射用蟾皮总碱质量标准
• 3.1 药品原料、辅料及成品的质量标准草案
• 3.2 药品原料、辅料及成品的质量标准起草说明
• 第4章 注射用蟾皮总碱主要药效学实验
• 4.1 实验材料
• 4.2 实验方法
• 4.3 实验结果
• 4.4 讨论
• 第5章 注射用蟾皮总碱一般药理实验
• 5.1 注射用蟾皮总碱对戊巴比妥钠催眠作用的影响
• 5.2 注射用蟾皮总碱对戊巴比妥钠阈下催眠作用的影响
• 5.3 注射用蟾皮总碱对小鼠自主活动及协调运动的影响
• 5.4 注射用蟾皮总碱对犬呼吸、血压及心电图影响
• 第6章 注射用蟾皮总碱安全性实验
• 6.1 注射用蟾皮总碱过敏实验
• 6.2 注射用蟾皮总碱溶血实验
• 6.3 注射用蟾皮总碱血管刺激性实验
• 6.4 注射用蟾皮总碱肌肉刺激性实验
• 第7章 注射用蟾皮总碱急性毒性实验
• 7.1 实验材料
• 7.2 实验方法
• 7.2.1 小鼠急性毒性实验
• 7.2.2 大鼠急性毒性实验
• 7.3 实验结果
• 7.4 讨论
• 第8章 注射用蟾皮总碱长期毒性实验
• 8.1 注射用蟾皮总碱大鼠长期毒性实验
• 8.2 注射用蟾皮总碱 Beagle 犬长期毒性实验
• 第9章 结论
• 9.1 注射用蟾皮总碱的制备工艺
• 9.2 注射用蟾皮总碱的质量标准
• 9.3 注射用蟾皮总碱对体外培养人肿瘤细胞生长的抑制作用
• 9.4 注射用蟾皮总碱一般药理实验
• 9.5 注射用蟾皮总碱的刺激性、过敏性、溶血性实验
• 9.6 注射用蟾皮总碱急性毒性实验
• 9.7 注射用蟾皮总碱长期毒性实验
• 参考文献
• 附图
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢
• 中文摘要
• Abstract