论文摘要
目的:肾小球肾炎是由多种原因导致肾小球损害为主的变态反应性疾病,其发病原因复杂,但大量实验和临床研究证明肾小球肾炎的大多数类型都是抗原抗体反应引起的免疫性疾病。随着肾小球肾炎发病率的逐年提高,对其的治疗手段得到越来越多的关注,目前临床上常用的治疗药物主要为免疫抑制剂和激素类药物,所用药物副作用多,毒性大,可抑制机体正常免疫并导致多种并发症。故寻找有效且安全的治疗肾小球肾炎的药物治疗已成为当前关注的热点。传统中医药中认为蛹虫草入肺肾,可补肾益肾,平衡阴阳。我们在本室的前期研究的基础上继续研究蛹虫草不同溶剂提取物的药理活性,以考察蛹虫草提取物是否可以作为肾小球肾炎的治疗药物作进一步开发,并为其提供实验依据。方法:本研究通过体内和体外实验两种方法研究蛹虫草提取物对免疫系统的影响和对肾小球肾炎的治疗作用。体外实验包括:①考察蛹虫草不同溶剂提取物对机体免疫系统的影响及相应浓度或剂量范围。观察蛹虫草不同溶剂提取物体外对肾小球系膜细胞增殖,小鼠淋巴细胞转化,腹腔巨噬细胞吞噬功能实验的影响,研究其对免疫系统的影响;②体内实验,通过小鼠碳末廓清实验和对小鼠迟发性超敏反应的影响,研究其在整体对免疫系统的影响;从而确认其功能并为后续研究打下基础。③建立系膜损伤和增生性肾炎模型,采用抗大鼠胸腺细胞血清制备模型,考察蛹虫草正丁醇提取物对系膜增生型肾小球肾炎的治疗作用。通过测定模型动物的24h尿蛋白,循环免疫复合物,红细胞花环及脾淋巴细胞转化功能,分析正丁醇提取物的药理作用,并用电镜和PAS染色病理切片等客观指标观察了模型制作的成功与否,考察了其对抗胸腺细胞血清性肾炎的防治作用。结果:1、对肾小球系膜细胞增殖的影响:蛹虫草的甲醇、正丁醇和乙酸乙酯提取物对正常系膜细胞增殖均有抑制作用,但甲醇、正丁醇提取物对LPS刺激激活的系膜细胞更为敏感。2、对免疫细胞的影响:乙酸乙酯和正丁醇提取物对正常及经ConA,LPS刺激的淋巴细胞转化均有显著抑制作用;两种提取物在较高浓度下显著性抑制腹腔巨噬细胞的吞噬功能。将正丁醇提取物进一步经大孔树脂分离后得到的70%乙醇分离部分在较高浓度下显著抑制腹腔巨噬细胞的吞噬功能;在较低浓度下有促进腹腔巨噬细胞吞噬功能。3、对循环免疫复合物的清除作用:蛹虫草正丁醇提取物10mg/kg给药组及20mg/kg给药组可降低模型动物的循环免疫复合物水平及降低红细胞CIC花环率。两种剂量给药组的24h尿蛋白降低,其中正丁醇提取物10mg/kg给药组比较有显著性差异;P<0.05。4.正丁醇提取物对大鼠系膜增生型肾小球肾炎的影响:经病理切片(PAS,Masson染色和电镜)显示模型大鼠的肾小球系膜基质溶解,系膜细胞增生,基底膜增厚,足突融合及部分肾小球坏死。蛹虫草正丁醇提取物10mg/kg及20mg/kg给药组的病理切片各项指标均有改善,其中正丁醇提取物10mg/kg给药组比较有显著性差异;P<0.05。讨论:蛹虫草不同溶剂提取物对免疫系统影响不同,乙酸乙酯提取物对肾小球系膜细胞增殖,淋巴细胞转化,腹腔巨噬细胞吞噬功能主要表现为免疫抑制作用,正丁醇提取物对上述实验及小鼠迟发性超敏反应主要表现出与浓度相关的免疫抑制或免疫调节作用。体内实验表明,正丁醇提取物对肾小球肾炎模型大鼠的各项病理指标均有改善作用,证明其在防治肾小球肾炎的作用具有进一步研究的价值。
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