论文摘要
以人白血病细胞株为模型,分别采用台盼蓝排斥法和吖啶橙(AO)—溴化乙锭(EB)荧光双染法对地高辛的细胞毒作用和凋亡诱导作用进行了考察,并应用流式细胞术(Flow Cytometry)、琼脂瑭凝胶电泳、蛋白免疫印迹技术(Western Blotting)对其作用及机制进行了初步探讨。地高辛在体外表现出明显的生长抑制作用。应用流式细胞术发现,地高辛可以使细胞出现明显的Sub-G1峰。AO-EB荧光双染法的结果显示,地高辛可以显著的诱导HL-60细胞形态凋亡,提示其生长抑制作用可能部分是由于诱导细胞凋亡引起的。地高辛不能诱导细胞内活性氧的蓄积。应用蛋白质免疫印迹技术进一步考察其作用机制发现,地高辛可以活化Caspase-8,活化Bid蛋白并降低线粒体膜电位(MMP),激活Caspase-3并诱导细胞调亡。综上所述,地高辛抑制白血病细胞生长可能通过诱导凋亡。其诱导凋亡诱导作用可能与caspase-8和caspase-3活化相关。