DAT、NET基因多态性与维医分型乳腺癌和其他癌症的相关性研究

论文摘要

维吾尔医学历来非常重视人体本身的统一性、完整性及其与自然界的相互联系,认为人体是一个有机整体,构成人体的各个脏器、组织或器官,在结构上是不可分割的。面对复杂性疾病,维吾尔医学有独特认识和理论。维吾尔医关于体液论有如下的阐述,体液是人类生命及生理活动过程的基本物质；体液不断生成,又被不断利用,为人体的物质代谢活动提供物质基础。体液之间保持着相对平衡、相互制约又相互补充。维医对恶性肿瘤的发病机制和临床表现有着独特的诠释,并提出根据不同的证候给于不同的预防和治疗。并认为异常黑胆质作为黑胆质、胆液质、粘液质和血液质等体液“燃烧”的最终病理产物,与肿瘤等难治性疾病的发生有着极其密切的关系。人类多巴胺转运体基因（dopamine transporter gene,DAT1）编码多巴胺转运体,当多巴胺释放到突触间隙后,调节多巴胺重新吸收回突触前神经末梢。人类DATl定位于5p15.3,在其3’端非翻译区存在一段40bp的核心可变数目串联重复序列,根据种群研究可出现3-13的重复。然而,在大多数的研究中,两个等位基因9-和10-重复序列是最常见的等位基因,而其余的都是稀少的,也常常在地理上受限制。DATl基因VNTR多态性不沉默,而影响该基因产生更高水平mRNA的表达,尤其是10-重复等位基因。交感神经释放的去甲肾上腺素（norepinephrine,NE） 80%-90%通过去甲肾上腺素转运体（norepinephrine transporter,NET）再摄取回到神经末梢中,NET对控制交感神经释放于突触间隙和肾上腺素能受体（adrenergic receptor, AR）周围的NE浓度,终止NE的作用有重要意义。NET基因位于16q12.2,长度约45 kb,由14个外显子组成。其5’端启动子区在转录调节方面起着非常重要的作用,据Fajas等报道SNP T/C（rs2242446）可能影响转录。本研究将分为以下三部分：第一部分DAT1 3’端VNTR区多态性与异常体液型癌症的相关性研究目的：探讨多巴胺转运体基因3’端40bp VNTR多态性与新疆维吾尔族异常体液型癌症相关性。方法：按维吾尔医将癌症患者分为4种体液型,采用聚合酶链式反应（PCR）和VNTR多态性分析技术对新疆省维吾尔族47例异常黑胆质型癌症患者、26例其它异常体液型癌症患者和57例正常对照组DATl多态性进行检测,比较各组间等位基因和基因型频率分布的差异。结果：（1）所测人群中,DAT1 VNTR多态性表现出6-11倍重复的6种等位基因,其中最为常见的等位基因为10倍重复的480bp片段,其基因频率为90.4%。共检出6种基因型,其中最常见的基因型为480bp/480bp,占80.7%。（2）DAT1 VNTR 10倍重复等位基因及10／10基因型个体患异常黑胆质型癌症的发病风险与非10倍重复等位基因和非10／10基因型个体差异无统计学意义（P=0.158；P=0.138）；异常黑胆质型癌症患者和其它异常体液型癌症患者的DAT1 VNTR等位基因及基因型频率的差异均无显著性（P=0.729；P=0.782）。结论：多巴胺转运体基因3’端40bp可变串联重复多态性可能与维吾尔医异常体液型癌症易感性无关。第二部分多巴胺转运体基因多态性与异常体液型乳腺癌的相关性研究目的：探讨多巴胺转运体基因3’端40bp VNTR多态性与新疆汉族人群异常体液型乳腺癌的相关性。方法：按维吾尔医将乳腺癌患者分为4种体液型,采用聚合酶链式反应（PCR）和VNTR多态性分析技术对新疆汉族144例乳腺癌患者和104例正常对照组DATl多态性进行检测,比较各组间等位基因和基因型频率分布的差异。结果：（1）所测人群中,DAT1 VNTR多态性表现出7、9-11倍重复的4种等位基因,其中最常见的等位基因为10倍重复的480bp片段,其基因频率为90.9%；共检出7种基因型,其中最常见的基因型为10／10倍重复,占83.1%。（2）异常粘液质型乳腺癌患者的DAT1 VNTR 10倍重复等位基因和10／10倍重复基因型频率显著高于正常对照组（OR=0.127,95%CI为0.016-0.988,P=0.026；OR=0.134,95%CI为0.018-1.016,P=0.020）和异常胆液质型乳腺癌患者组（OR=0.132,95%CI为0.016-1.075,P=0.049；OR=0.132,95%CI为0.017～1.042,P=0.033）。结论：多巴胺转运体基因3’端40bp VNTR 10倍重复等位基因和10／10倍重复基因型可能增加新疆汉族维吾尔医异常粘液质型乳腺癌的发病风险,可能与异常胆液质型乳腺癌易感性无关。第三部分去甲肾上腺素转运体基因T-182C多态性与异常体液型乳腺癌易感性的研究目的：探讨去甲肾上腺素转运体基因T-182C多态性与新疆汉族人群异常体液型乳腺癌的相关性。方法：按维吾尔医将乳腺癌患者分为4种体液型,采用聚合酶链式反应（PCR）和SNP多态性分析技术对新疆汉族126例乳腺癌患者和90例正常对照组NET基因T-182C多态性进行检测,比较各组间等位基因和基因型频率分布的差异。结果：（1）NET基因T-182C的等位基因和基因型频率在总的乳腺癌患者组与正常对照组之间（P=0.249；P=0.152）和异常体液型乳腺癌患者组与正常对照组之间（P>0.05）差异无显著性（2）异常黑胆质型乳腺癌患者和其它异常体液型癌症患者的T-182C等位基因及基因型频率的差异均无显著性。结论：去甲肾上腺素转运体基因T-182C多态性可能与新疆汉族人群乳腺癌或异常体液型乳腺癌无关。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一部分 文献综述
• 1 引言
• 2 多巴胺概述
• 2.1 多巴胺的作用
• 2.2 多巴胺神经系统的组成及功能
• 2.3 多巴胺转运体概述
• 2.4 多巴胺转运体基因多态性的研究进展
• 3 去甲肾上腺素概述
• 3.1 去甲肾上腺素的分布及作用
• 3.2 去甲肾上腺素转运体概述
• 3.3 去甲肾上腺素转运体基因的研究进展
• 4 维吾尔医体液论概述
• 4.1 维吾尔医体液论简介
• 4.2 正常体液及其特征
• 4.3 异常体液的主要症状及其常见疾病
• 4.4 维吾尔医异常体液疾病的治疗原则
• 第二部分 材料与方法
• 1 研究对象
• 2 主要试剂和溶液
• 2.1 试剂
• 2.2 主要溶液配制
• 3 主要仪器
• 4 实验方法
• 4.1 盐析法提取血样DNA
• 4.2 DNA的定性、定量分析
• 4.3 DAT1和NET基因多态性检测
• 4.4 遗传统计学分析
• 第三部分 结果
• 1 样本DNA提取结果
• 2 基因分型结果
• 2.1 维吾尔族样本DAT1 PCR产物电泳结果
• 2.2 汉族样本DAT1 PCR产物电泳结果
• 2.3 汉族样本NET基因PCR产物电泳结果
• 2.4 汉族样本NET基因PCR产物酶切电泳结果
• 2.5 Hardy-Weinberg平衡吻合度检验
• 2.6 对照组和患者组的基因型和等位基因频率分布
• 第四部分 讨论与结论
• 1 维吾尔族DAT1基因的多态性及与异常体液型癌症的关系
• 1.1 维吾尔族DAT1基因的多态性
• 1.2 DAT1基因的多态性与维吾尔族异常体液型癌症的关系
• 2 汉族DAT1基因的多态性与异常体液型乳腺癌的关系
• 3 汉族NET基因T-182C位点多态性与异常体液型乳腺癌的关系
• 4 结论
• 参考文献
• 附录
• 个人简历
• 发表论文清单
• 致谢