论文摘要
目的:1、探讨孕晚期使用乙肝免疫球蛋白对乙肝病毒S基因变异的影响;2、探讨乙肝病毒（HBV）基因分型在HBV宫内传播方面的意义;方法:收集2006年12月～2007年12在广州暨南大学第一临床附属医院行常规系统产检时乙肝表面抗原（HBsAg）阳性、HBV-DNA滴度检测＞1.0×103copies/ml的孕妇及其所生新生儿,按孕妇是否采取孕28周起HBIG 200 IU/4周肌肉注射分为HBIG实验组与HBIG对照组进行如下研究:①采集孕妇注射HBIG前（对照组为初次产检时）的外周静脉血和分娩前的外周静脉血以及其新生儿出生24小时内的外周静脉血,用ELISA法检测孕妇及其新生儿血清乙肝病毒标志物（HBV-M）;用荧光定量聚合酶链反应（Fluorescence Quantitativepolymerase chain reaction,FQ-PCR）法检测孕妇及其新生儿血清HBV DNA;②采用巢式PCR扩增HBV S区产物直接测序;③利用DNASTAR、ALIGN X序列分析软件包分析乙型肝炎病毒序列,通过与GENBANK中标准序列进行比对,分析HBV基因型以及HBVS基因变异情况;④统计分析使用SPSS 13.0 for windows软件包。结果:1.在收集的131组样本中HBIG实验组有84组,HBIG对照组为47例。成功检测到HBVS区序列的共106例,其中属于HBIG实验组的有73例,HBIG对照组有33例。成功采集的新生儿血样共60例,检测其外周血HBV-DNA滴度＞1.0×103copies/ml的8例,成功检测到HBV S区序列的有7例。2.106例孕母HBVS区序列测序比对后,共有26例属于HBV B基因型,80例为HBV C基因型。HBIG实验组中B型17例（23.29%）,C型56例（76.71）,HBIG对照组B型9例（27.27%）C型24例（72.73%）。7例HBV-DNA阳性的新生儿皆为HBV C基因型。3.与GENBANK标准株比对,106例孕妇在注射HBIG前（对照组为初次产检时）感染的HBV S基因测序检测变位点有aa54、75、101、106、113、126、133、134、143、146、158、177、182、200、210、211、250、257,发生在“a”抗原决定簇的有aa126、133、134、143、146,大多数位点的突变均导致了氨基酸替换。4.比对孕母注射HBIG前（对照组为初次产检时）的外周静脉血HBV S区序列和分娩前的外周静脉血HBV S区序列后未发现核苷酸的变异。5.无论HBIG实验组还是HBIG对照组,HBV B基因型感染者与C型感染者,其外周静脉血HBV-DNA滴度在用药前后的变化均无统计学差异。6.7例HBV-DNA阳性的新生儿,其HBV S区序列与母亲HBV S区序列同源性为99.2%～100%。在HBIG对照组中,1例孕母及其新生儿检测到HBV相似株混合感染。7.HBIG实验组与HBIG对照组孕妇的新生儿HBsAb阳性率并未发现统计学差异。结论:1、孕晚期注射HBIG并不会造成孕母注射后至分娩前时间内的HBV S区核苷酸变异。2、孕母携带的HBV基因型对HBV宫内传播率无显著性影响;3、孕晚期使用HBIG对HBV-DNA滴度影响不显著。3、新生儿与其母感染的HBV S区序列同源性高,即新生儿所感染的HBV来源于其母。
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