论文摘要
目的针对凋亡抑制因子Survivin应用RNA干扰技术（RNA interference，RNAi）抑制膀胱癌细胞细胞株BIU-87细胞内源性Survivin基因的表达进而促进膀胱癌细胞株BIU-87细胞凋亡。方法构建重组质粒pshRNA-survivinl、pshRNA-survivin2和pshRNA-survivin3并分别转染BIU-87细胞株，应用免疫组化检测细胞中Survivin蛋白的表达，通过噻唑蓝比色法（MTT）检测细胞生长增殖抑制率，利用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果构建的3种重组质粒pshRNA-survivinl、pshRNA-survivin2和pshRNA-survivin3均能明显抑制Survivin基因的表达；应用免疫组化检测BIU-87细胞中Survivin基因的表达，转染重组质粒pshRNA-sHrvivinl、pshRNA-survivin2和pshRNA-survivin3的实验组Survivin染色深度均明显低于仅转染脂质体、空载体Pgenesil-1和非特异对照质粒pshRNA-hk的对照组荧光强度；MTT法检测结果显示转染3种重组质粒pshRNA-survivinl、pshRNA-survivin2和pshRNA-survivin3的BIU-87细胞的增殖活性均明显下降；通过流式细胞仪TUNEL法检测BIU-87细胞的凋亡分别达49.48±1.88％（P＜0.01）、51.37±3.55％（P＜0.01）和50.07±3.95％（P＜0.01）。结论膀胱癌细胞高表达Survivin，而重组质粒pshRNA-survivinl、pshRNA-survivin2和pshRNA-survivin3均可明显且特异性抑制BIU-87细胞内源性Survivin的表达并可以促进膀胱癌细胞凋亡和增殖活性明显下降，提示特异性干扰Survivin的表达作为治疗膀胱癌新方法的可行性，为Survivin介导的膀胱癌基因沉寂疗法提供良好的实验基础。
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