柿叶中酚类物质的提取、纯化及初步鉴定研究

论文摘要

本文以柿叶为试料,研究了柿叶中多酚类化合物的提取工艺条件及其纯化方法,并通过颜色反应法,高效液相色谱法初步鉴定柿叶中多酚化合物。1.以没食子酸为标准样品,应用紫外可见分光光度法,得出柿叶总酚的标准曲线,标准曲线的回归方程为y=82.495x+0.0108,且r2=0.9991。采用该方法测定了不同时期柿叶中总酚含量变化,发现5月份柿叶中总酚含量最高,随着时间的延后,总酚含量呈下降趋势。综合各方面因素考虑,选择5月的柿叶作为提取原料较为适宜。2.本研究首次采用超声波法对柿叶中的多酚类化合物进行了提取研究,通过单因素和正交试验得出乙醇提取柿叶中多酚物质的最佳工艺条件为：40%的乙醇、温度为50℃、料液比为1：40的条件下提取20min,在此条件下测得总酚提取率为5.69%。3.在获取多酚粗提液后,对超声波提取出的柿叶粗提液中多酚类物质的纯化方法进行了探索,结论：分离纯化柿叶总酚最佳工艺条件为：AB-8型大孔吸附树脂,上柱液总酚浓度为2.67mg/ml,流速2ml/min,上柱液pH值为5。待吸附饱和后,先用蒸馏水洗脱,以除去杂质,再用70%乙醇洗脱,洗脱速度为1.5ml/min,洗脱剂用量为250mL,可得到纯度为33.64%的多酚纯化物。纯化后的样品通过颜色反应法、高效液相色谱法初步鉴定,初步结果表明,纯化后的样品中含有多酚类化合物。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1 柿叶研究概况
• 1.1 柿叶化学成分研究
• 1.1.1 黄酮类化合物
• 1.1.2 三萜类化合物
• 1.1.3 香豆素类化合物
• 1.1.4 植物甾醇类化合物
• 1.1.5 脂肪酸
• 1.1.6 有机酸和无机阴离子
• 1.1.7 挥发成分
• 1.1.8 其他有效成分
• 1.2 柿叶的药理作用
• 1.2.1 抗过敏作用
• 1.2.2 预防贫血和减肥美容作用
• 1.2.3 抑制特异性皮炎作用
• 1.2.4 抗氧化作用
• 1.2.5 抗菌作用
• 1.3 多酚研究概况
• 1.3.1 多酚类化合物的结构
• 1.3.2 植物多酚的化学性质
• 1.4 多酚的生物活性
• 1.4.1 抗动脉硬化、防治冠心病与中风等心血管疾病
• 1.4.2 抗老化和防晒美容作用
• 1.4.3 抗癌作用
• 1.4.4 抗氧化作用
• 1.4.5 抑菌消炎和抗病毒作用
• 1.5 多酚类化合物的应用
• 1.5.1 在食品上的应用
• 1.5.2 在生态环境中的应用
• 1.5.3 在农业上的应用
• 1.5.4 在医药上的应用
• 1.5.5 在化妆品中的作用
• 1.6 植物多酚的提取方法
• 1.6.1 有机溶剂提取法
• 1.6.2 超声波提取法
• 1.6.3 微波提取法
• 1.6.4 超临界流体萃取
• 1.6.5 生物酶解提取法
• 1.6.6 膜技术提取法
• 1.7 大孔吸附树脂的应用研究进展
• 1.7.1 大孔树脂的吸附分离原理
• 1.7.2 大孔吸附树脂的应用
• 1.7.3 影响大孔吸附树脂纯化天然产物的因素
• 2 本研究目的和内容
• 2.1 研究目的和意义
• 2.2 主要研究内容及技术路线
• 第二章 超声波提取柿叶总酚
• 1 实验材料、仪器和试剂
• 1.1 实验材料
• 1.2 试验仪器与试剂
• 2 实验方法
• 2.1 配制福林酚试剂
• 2.2 确定最大吸收波长
• 2.3 绘制标准曲线
• 2.4 制备样品溶液和总酚提取率计算
• 2.5 单因素实验
• 2.5.1 确定最适提取剂
• 2.5.2 乙醇浓度对总酚提取率的影响
• 2.5.3 料液比对总酚提取率的影响
• 2.5.4 提取温度对总酚提取率的影响
• 2.5.5 提取时间对总酚提取率的影响
• 2.6 正交试验设计
• 3 结果与分析
• 3.1 吸收波长的确定
• 3.2 标准曲线的建立
• 3.3 精密度试验
• 3.4 稳定性试验
• 3.5 重现性评价
• 3.6 回收率评价
• 3.7 不同季节柿叶中总酚含量的变化规律
• 3.8 提取条件对提取效果的影响
• 3.8.1 不同溶剂对提取率的影响
• 3.8.2 乙醇浓度对总酚提取率的影响
• 3.8.3 不同料液比对柿叶总酚提取率的影响
• 3.8.4 不同温度对柿叶总酚提取率的影响
• 3.8.5 不同时间对柿叶总酚提取率的影响
• 3.9 正交试验结果与分析
• 4 小结与讨论
• 第三章 柿叶多酚纯化工艺的研究
• 1. 实验材料
• 2. 实验方法
• 2.1 柿叶多酚纯化工艺方案
• 2.2 树脂的预处理
• 2.3 大孔吸附树脂的再生
• 2.4 装柱
• 2.5 最佳树脂的确定
• 2.5.1 静态吸附实验
• 2.5.2 静态解吸实验
• 2.5.3 树脂的吸附动力学特征
• 2.5.4 动态吸附实验
• 2.5.5 动态解吸实验
• 2.6 吸附条件单因素实验
• 2.6.1 提取液浓度对吸附量的影响
• 2.6.2 上柱流速对吸附量的影响
• 2.6.3 提取液PH值对吸附量的影响
• 2.7 吸附条件的优化
• 2.8 解吸条件单因素实验
• 2.8.1 洗脱剂浓度的确定
• 2.8.2 洗脱剂用量的确定
• 2.8.3 洗脱流速的确定
• 2.9 解吸条件的优化
• 3 结果与分析
• 3.1 最佳树脂的确定
• 3.1.1 各树脂静态吸附量、解吸率的测定
• 3.1.2 大孔吸附树脂静态吸附动力学曲线
• 3.1.3 动态吸附实验
• 3.2 AB-8大孔吸附树脂对柿叶总酚的动态吸附条件
• 3.2.1 上样浓度对吸附效果的影响
• 3.2.2 吸附流速对吸附效果的影响
• 3.2.3 上样液PH值的选择
• 3.3 吸附条件的优化
• 3.4 AB-8大孔吸附树脂对柿叶总酚的动态解吸条件
• 3.4.1 洗脱剂浓度对解吸效果的影响
• 3.4.2 洗脱剂用量对洗脱效果的影响
• 3.4.3 洗脱流速对洗脱效果的影响
• 3.5 解吸条件的优化
• 4 小结与讨论
• 第四章 柿叶酚类化合物的初步鉴定
• 1 试验材料
• 2 试验方法
• 2.1 化学检识
• 2.2 高效液相色谱法
• 3 试验结果与分析
• 3.1 化学检识法
• 3.2 高效液相色谱法
• 4 小结与讨论
• 全文结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介