钩藤叶生物碱有效部位的制备工艺、药理活性和急性毒性研究

论文摘要

钩藤叶来源于茜草科植物钩藤Uncaria rhynchophylla（Miq.）Jacks.、华钩藤U.sinensis（Oliv.）Havil.、大叶钩藤U.macrophylla Wall.、毛钩藤U.hirsuta Havil.、无柄果钩藤U.sessilifructus Roxb.的干燥叶。钩藤叶中钩藤生物碱类成分种类和含量与钩相似,是一个具有开发价值的新药用植物资源。本文对钩藤叶生物碱有效部位的制备工艺、药理活性和急性毒性进行了研究,主要内容如下:1.采用硅胶柱色谱、反相柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备液相色谱等分离方法,建立了钩藤碱（rhynchophylline）、异钩藤碱（isorhynchophylline）、去氢钩藤碱（corynoxeine）、异去氢钩藤碱（isocorynoxeine）和喜果苷（vincoside lactam）等5种生物碱对照品制备工艺,并研究了5种生物碱对照品的理化鉴定和光谱解析等结构鉴定的方法和数据,为钩藤叶提取物和生物碱有效部位的定量分析法研究奠定了物质基础。2.以提取物收率、钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱和喜果苷等5种生物碱指标成的含量及其转移率为考察指标,对钩藤叶提取物制备工艺及其生物碱有效部位的大孔吸附树脂纯化工艺进行了系统研究,确定钩藤叶生物碱有效部位的制备工艺。结果显示:钩藤叶提取物中5种生物碱指标成分含量总和为3.65%,生物碱有效部位中5种生物碱指标成分含量总和大于60%,含量较提取物提高了近15倍。本精制工艺简单,质量稳定、有效成分含量高,适宜于钩藤叶生物碱有效部位的富集和纯化,为钩藤生物碱类有效部位新药研发提供实验基础。3.对比研究了钩藤叶提取物、钩藤钩提取物和钩藤叶生物碱有效部位对体外LPS激活小胶质细胞释放NO的抑制作用和急性毒性。结果表明:钩藤叶生物碱有效部位可剂量依赖性地抑制小胶质细胞活化,IC50为10.7mg/mL,而钩藤叶和钩提取物均未表现出明显的抑制作用,从药理学方面证明了钩藤叶生物碱有效部位制备工艺的合理性和有效性;同时急性毒性试验表明,钩藤叶和钩提取物毒性甚小,测定其最大耐受量为10g/kg,钩藤叶生物碱有效部位LD50为1406.4±198.9mg/kg,该结果对钩藤叶及生物碱有效部位开发利用提供毒理学基础依据。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词说明
• 第一章 钩藤的研究概况
• 1.1 本草考证
• 1.2 钩藤属植物资源分布与现状
• 1.3 钩藤属植物的化学成分研究进展
• 1.4 钩藤属植物的药理及毒理学研究概况
• 1.5 钩藤植物及其制剂的临床应用
• 1.6 钩藤叶的研究
• 1.7 立题依据
• 第二章 钩藤叶生物碱对照品研究
• 2.1 实验部分
• 2.2 结果与讨论
• 2.3 小结
• 第三章 钩藤叶生物碱有效部位的制备工艺研究
• 3.1 实验部分
• 3.2 结果与讨论
• 3.3 小结
• 第四章 钩藤叶提取物和生物碱有效部位抗小胶质细胞活化作用及急性毒性的初步研究
• 4.1 实验部分
• 4.2 结果与讨论
• 4.3 小结
• 第五章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附图