目的水的跨膜转运对维持细胞的正常代谢具有重要作用。1992年以来大量研究证实机体内广泛存在着特异性的水通道蛋白家族（Aquaporins，AQPs）。AQP1在体内扮演着重要角色，参与渗透压驱动下的水的转运，介导药理作用，和参与水肿的形成等。但AQP1与凋亡之间是否存在着联系，现在还有争议。本实验应用特异性靶向AQP1表达基因的siRNA（short interfering RNA），抑制小鼠Balb／c 3T3成纤维细胞的AQP1的表达。并通过观察α-溶血素对这种AQP1表达受抑制的细胞所造成的表型变化，初步探讨AQP1在细胞凋亡中的作用。方法1、实验分三组：normal cell组，为正常细胞；control-RNAi组，为非特异性靶向AQP1的siRNA转染的细胞；AQP1-RNAi组，为特异性靶向AQP1的siRNA转染的细胞。应用α-溶血素（30ug／ml）作用于细胞，4h后观察细胞的表型的变化。2、western blot检测AQP1蛋白量，倒置显微镜观察细胞形态学变化，流式细胞术检验细胞凋亡率。结果1、利用RNAi转染技术抑制成纤维细胞Balb／c3T3的AQP1表达，western blot验证AQP1蛋白表达。AQP1-RNAi组AQP1表达较normal cell组减少60.55％，较control-RNAi组减少48.85％。2、加入适量的α-溶血素（30ug／ml），4h后流式细胞术检测，观察到normal cell组凋亡率为6.07％，control-RNAi组凋亡率为6.71％，AQP1-RNAi组凋亡率为9.76％。各组均出现亚二倍峰，凋亡率都较未加毒素时有所增加。且AQP1-RNAi组凋亡率，较正常细胞组增加3.69％，较control-RNAi组增加3.05％。倒置显微镜检测，观察到各组均出现凋亡相关的形态学变化，主要表现为细胞变圆、皱缩、反光增强，与临近细胞分离，脱落。AQP1-RNAi组发生变化的细胞及脱落细胞的数目较其余两组多，且细胞的变圆、皱缩也较其余两组变化显著。讨论α-溶血素促使细胞凋亡，4h后发现AQP1-RNAi组凋亡率较正常细胞组、control-RNAi组有所增加。提示了胞膜AQP1表达减少可能导致了细胞凋亡率的变化，细胞AQP1蛋白表达下降致使水的外流受阻，不能代偿的排出毒素所引起的大量的内流水，从而造成凋亡率较正常细胞呈上升趋势。本研究结果表明，胞膜AQP1可能参与了细胞凋亡的调节，但尚需进一步的实验证实。结论1、应用RNAi技术可抑制成纤维细胞AQP1的表达，使胞膜AQP1蛋白表达量显著下降。2、AQP1可能参与了细胞凋亡的调节。
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