目的:通过对临床上长年应用的确有理想疗效的抗幽合剂研究进行优化,并采用均匀设计的方法,开展体外实验,进而筛选出最佳组合,将12味中药优化精简为5味中药,对精简方组方的剂量运用均匀设计的方法进行体外药效学实验,根据实验结果选出药效好的前三种组合。并探讨其作用机理。材料与方法:1.材料:微需氧恒温培养箱（中国医科大学第一附属医院中心实验室）、超净化工作台（中国医科大学第一附属医院中心实验室）、高纯氧气,高纯氮气,二氧化碳气体（沈阳鑫东基气体有限公司）、温度湿度表（沈阳市爱尔普仪器有限公司公司）、幽门螺旋杆菌菌株（中国医科大学第一附属医院中心实验室）、脑心浸液琼脂（北京华业寰宇化工有限公司）、和混合抗生素（两性霉素）、万古霉素、磺胺ZSO增菌剂、中药:黄芪、苦参、蒲公英、黄连、生甘草（辽宁中医药大学附属第一医院）。氧化酶试剂盒、尿素酶试剂盒、过氧化氢酶试剂盒（杰美基因微生物试剂有限公司）、羊血清（中国医科大学第一附属医院中心实验室）。2.方法:培养并保存幽门螺旋杆菌。将由5味中药组成的优化组方用5因素9水平均匀设计表进行设计分组。根据文献及临床经验确定每味药物的剂量范围,制备中药药液,进行药效学实验:杀菌实验、MIC（最小抑菌浓度）实验、纸片法（药敏实验）。培养基PH值对中药复方MIC的影响。将实验结果应用均匀设计软件进行统计分析,得出回归方程,并选出药效好的前三种组合。结果:1.抑菌实验:杀菌率较好的分别为9d组:89.5﹪、8c组:85﹪、6c组:82﹪。2.MIC（最小抑菌浓度）实验:中药组方第6组单独应用,幽门螺旋杆菌的MIC80为:62.5ug/mL;中药组方第8组单独应用;幽门螺旋杆菌的MIC80为:62.5ug/mL中药组方第9组单独应用,幽门螺旋杆菌的MIC80为:31.25ug/mL。结合用显微镜观察其中6、8、9组中药组方抑制细菌生长的效果较好。3.不同组合药物MIC的测定:中药组方各味中药间有协同或相加作用。组方组成具有合理性,合用可以增强药效。4.抑菌圈的测定:抑菌圈41mm左右的有:6c、8c、9d、9c组。药效好的前三种中药剂量组合分别为第6组、第8组、第9组。结论:通过体外实验筛选抗幽门螺旋杆菌的优势组合:黄芪、蒲公英、苦参、黄连、生甘草及最佳配伍用量:第6组药物剂量依次为:20g、8g、15g、10g、2g;第8组药物剂量依次为:28g、24g、12g、2g、0g;第9组药物剂量依次为:32g、32g、24g、16g、8g对抗幽门螺旋杆菌确有作用。
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