目的:探讨褪黑素（melatonin,MT）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）的神经保护作用以及MT的用药时间窗。 方法:选用7日龄的Sprague-Dawley大鼠,随机分为假手术组（sham组）、模型组（HIBD组）、MT治疗组（按给药时间分为HIBD前组、HIBD后0小时组、HIBD后1小时组、HIBD后2小时组）。建立新生鼠HIBD模型后,于不同时间点取材,脑组织分别行HE染色、原位末端标记技术（TUNEL）检测皮质及海马神经元的凋亡、免疫组化法检测神经元特异性烯醇化酶（neurone specific enolase,NSE）的表达,心脏采血分离血清后用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA）检测NSE的水平,并比较各组之间的差异。 结果:TUNEL法显示皮质和海马神经元的凋亡于缺氧缺血后6小时开始出现,24小时达高峰,然后逐渐下降,MT治疗组组间存在差异,但各组在6小时、12小时、24小时、48小时、72小时均显著低于HIBD组（p<0.01）;脑组织中NSE的变化与血清中NSE的变化显著负相关（r=-0.92）,与皮质凋亡细胞数的变化也呈显著负相关（r=-0.892）,NSE的变化于缺氧缺血后6小时开始出现,24小时变化达到高峰,然后开始回落,MT治疗组组间存在差异,但各组在6小时、12小时、24小时、48小时、72小时均显著优于HIBD组（p<0.01）;MT治疗组组间比较,HIBD前组、HIBD后0小时组、HIBD后1小时组各项指标的变化差异性不明显（p>0.05）,但它们与HIBD后2小时组在各项指标的变化上均有显著性差异（p<0.05）。 结论:①褪黑素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤有预防和治疗作用。②血清NSE的变化能够很好地反映HIBD脑损伤的情况。③皮质神经元的凋亡细胞数与皮质NSE的变化负相关。④褪黑素治疗组的神经元凋亡明显少于模型组。⑤褪黑素在HIBD的治疗上存在时间窗,预防用药和HIBD后2小时内给药效果明显,而且HIBD后1小时内给药优于HIBD后2小时给药。
本文来源: https://www.lw50.cn/article/07462b3c0e36824d3243ecd8.html