目的：研究羟基磷灰石纳米颗粒介导DNA转染的影响因素。方法：观察聚乙烯亚胺（Polyethylenimine, PEI）等表面活性剂处理的羟基磷灰石纳米颗粒（nanoparticle hydroxyapatite,简称nHA）（以下简称PEI-nHA）混悬液在室温下的悬浮稳定性；用PEI-nHA与携带CX26基因的质粒DNA形成的复合物转染Hela细胞。在转染过程中,通过分别改变四个重要实验条件（PEI-nHA浓度、DNA量、细胞接种数量、共转染时间）的参数,观察基因转染效率的变化；不同的基因载体（未经修饰的nHA、PEI-nHA、PEI）与携带CX26基因的质粒DNA形成的复合物转染Hela细胞,观察转染效率。结果：PEI-nHA配置成不同浓度的混悬液在室温下静置24小时后观察,具有良好的悬浮稳定性。静置2个月后观察,浓度为≥1000μg/ml的PEI-nHA悬浮稳定性良好,浓度≤500μg/ml的可见分层。PEI-nHA转染质粒DNA研究结果：1) PEI-nHA最佳浓度为250μg/ml; 2)DNA最佳量为2μg; 3) Hela细胞接种按4×105计数较适宜；4)共转染最佳时间为6小时。未经修饰的nHA转染率在10%左右；PEI-nHA的转染率在28%左右；PEI的转染率在55%左右。结论：1.经PEI修饰后的nHA载体具有良好的分散性和悬浮稳定性；高浓度的PEI-nHA悬浮稳定性较低浓度的PEI-nHA悬浮稳定性好,提示液相PEI-nHA应以高浓度保存；2.PEI修饰nHA提高了nHA体外细胞转染率；3.PEI的转染率高于PEI-nHA.4.PEI-nHA的体外转染率为28%。
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