支气管肺炎(bronchopneumonia)又称小叶肺炎,多见于婴幼儿,是威胁我国儿童健康的严重疾病,其发病率、病死率均居首位。支气管肺炎,最常见可由细菌或病毒引起,发达国家病原以病毒为主,发展中国家则以细菌为主。目前临床细菌检测主要依赖于血培养,但结果回报时间长,阳性率低,无法做出早期诊断。因此临床需要有早期判断细菌感染的检测手段,以指导临床用药。本课题主要研究小儿支气管肺炎细菌血流感染时,检测细菌16S rRNA基因与血培养、CRP和WBC计数方法之比较,以探讨支气管肺炎细菌感染的早期诊断方法。在16S rRNA基因保守区选出通用引物,优化并确定PCR反应条件提取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等细菌DNA进行聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR),并观察扩增结果,对临床诊断为支气管肺炎患儿及同期发热患儿血液中提取DNA进行PCR扩增,同时对以上患儿血液进行血培养、CRP及WBC检测。应用统计软件SPSS17.0 FOR Windows进行数据分析。用PCR方法扩增细菌,经电泳在相当于1300bp处均可见一条DNA带,而与病毒及人基因DNA无交叉反应。56例支气管肺炎患儿16S rRNA基因检测阳性48例,血培养阳性12例,本研究采用PCR方法检测细菌16S rRNA的敏感性、特异性及诊断指数分别为：85.71%,94.11%,179.82。PCR阳性检出率高,与血培养、CRP及WBC检测相比较有较明显的优势,可做为细菌感染的诊断指标之一。用PCR方法检测细菌16S rRNA基因具有较高的敏感性和特异性,优于WBC计数、CRP。对于支气管肺炎的患儿,16S rRNA基因检测能快速诊断是否为细菌感染,可达到早诊断、早治疗、早停药的目的,更好的指导临床用药。PCR检测细菌16S rRNA基因的方法为临床小儿细菌感染性疾病的诊断提供了一个快捷的方法。
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