目的:乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一,其发病率占妇女肿瘤的31%,几乎所有的死亡原因都是远处转移。就诊时95%的患者在体检、生化、影像检查无远处转移证据,甚至在手术彻底切除病灶和组织学腋窝淋巴结没有受侵的情况下,仍有30%的患者5年内出现复发和转移。如何期将具有潜在转移危险的患者筛选出来,给予积极治疗,是提高乳腺癌生存率的关键所在。Maspin基因作为肿瘤侵袭和转移潜能的抑制因子,可能成为乳腺癌转移及预后评估的一个重要指标。本实验应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法对30例原发性乳腺癌组织中Maspin基因的mRNA表达进行检测,同时抽取外周血检测乳腺组织特异性标志物hMAM（人乳腺球蛋白）的基因表达,结合病人淋巴结转移情况,探讨Maspin基因表达与乳腺癌转移的关系。以期为乳腺癌的微小转移、生物学特性及预后推断提供一种新的有效途径。方法:选取我院新治乳腺癌病人30例,均经病理证实为浸润性导管癌,其中有腋窝淋巴结转移8例,无腋窝淋巴结转移22例。麻醉后术前抽取肘静脉血10ml,淋巴细胞分离液分离出单核细胞,加入Trizol液1ml于-20℃冰箱保存。术中切取病灶后解剖出癌结节,一半送术中病理,一半经磷酸缓冲液处理后立即放入液氮中保存,转移至实验室-70℃冰箱保存。上述标本首先分别提取总RNA,然后以RNA为模板反转录合成cDNA,再以cDNA为模板进行体外扩增反应,同时加入内参照。扩增产物凝胶电泳,紫外灯下观察结果。所有资料采用采用SPSS12.0统计软件包进行X2检验,P<0.05,差异在统计学上有显著意义。结果:外周血提取的RNA均可扩增出一条528bp的GAPDH条带,hMAM的扩增条带为361bp;所有乳腺癌组织提取的RNA均可扩增出一条294bp的GAPDH条带,Maspin的扩增条带为129bp。1、在有淋巴结转移的8例病人中,Maspin表达阴性87.5%（7/8）,在无淋巴结转移的22例病人中, Maspin表达阴性31.8%（7/22）。两组比较有显著差异。2、在外周血hMAM表达阳性组中,Maspin表达阴性73.3%（11/15）;在外周血hMAM表达阴性组中,Maspin表达阴性20%（3/15）,两组比较有显著差异。3、在有淋巴结转移的8例病人中,hMAM表达阳性100%（8/8）,在无淋巴结转移的22例病人中, hMAM表达阳性31.8%（7/22）。两组比较有显著差异.结论:Maspin基因作为肿瘤侵袭和转移潜能的抑制因子,在出现淋巴结转移或微小转移的乳腺癌病人中,其乳癌组织中mRNA表达缺失明显增加,因此可用于乳腺癌微小转移、淋巴结转移及患者预后不良的预测因素之一。
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