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羊传染性脓疱病毒VEGF基因的克隆及PCR诊断方法的研究

论文摘要

本试验对羊传染性脓疱病毒吉林省分离株Orf-ys株进行传代培养,待出现典型的细胞病变后收毒并进行DNA的提取,根据已发表的羊传染性脓疱病毒B2L基因序列,设计引物,进行VEGF基因的特异性扩增,并将其克隆到pMD18-T载体后进行测序。结果表明:Orf-ys株的VEGF基因长为414bp。经核苷酸序列比较、分析结果表明:Orf-ys株与Matsumoto同源性最高,达98%,与IT01最低,为84%,说明Orf-ys株VEGF基因与参考毒株之间差异不大。本试验根据已发表的羊传染性脓疱病毒NZ2株的序列,设计引物,对Orf-ys株、羊痘病毒和新生犊牛睾丸原代细胞的核酸进行PCR扩增,结果表明:只有Orf-ys株扩增出414bp左右的特异性片段,其它均为阴性,说明该PCR扩增体系具有良好的特异性。对Orf-ys株进行敏感性试验,结果表明:该PCR扩增体系可检测出4.5ng模板,说明该PCR扩增体系具有较高的敏感性。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 前言
  • 1 羊传染性脓疱病简介
  • 2 病原学
  • 3 Orf V免疫特性
  • 4 流行病学
  • 5 临床症状
  • 6 病理变化
  • 7 病毒的致病机理
  • 8 诊断
  • 9 预防
  • 10 治疗
  • 第二章 羊传染性脓疱病毒VEGF基因的克隆及PCR诊断方法的研究
  • 1 试验材料
  • 2 试验方法
  • 3. 试验结果
  • 4. 讨论与分析
  • 第三章 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 个人简介
  • 相关论文文献

    本文来源: https://www.lw50.cn/article/1e3333f4eb84a0c3580717eb.html