C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)是一种人类急性期血浆蛋白,属于环状五聚体蛋白家族。CRP在先天免疫中扮演重要角色,且与多种慢性炎症疾病的病生理过程相关。在五聚体CRP蛋白配体结合面和效应面分别具有Ca2+离子结合位点、PC结合位点和Clq结合位点等重要结构元件;单体间相互作用预测其具有4对离子键,疏水作用也是亚基问相互作用的主要形式;在每个亚基内36位和97位半胱氨酸间形成二硫键,在蛋白功能转换和结构稳定性维持方面具有重要作用。在实验中,我们利用相关氨基酸定点突变,研究这些重要结构元件在CRP的胞内折叠、组装过程中的作用。结果显示,Ca2+离子结合是蛋白结构稳定和五聚体构象维持的重要因素,同样单体间形成的离子键也是五聚体形式所必需的。有意思的是,通过在亚基组装界面上引入亚基间二硫键,我们表达出了一种具有特殊结构特征的CRP。这些发现有助于对CRP胞内折叠、组装机制的深入理解。
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