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益智健脑颗粒对P8品系快速老化小鼠内嗅区蛋白表达的影响

论文摘要

目的分析中药益智健脑颗粒干预前后P8品系快速老化小鼠(Senescence Accelerated Mouse P8,SAMP8)内嗅区组织的差异蛋白质表达,从蛋白质角度探讨中药益智健脑颗粒治疗阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的作用机理。方法将6月龄SAMP8 30只随机分为治疗组(n=10)、模型组(n=10)和对照组(n=10),治疗组以益智健脑颗粒浓缩液灌胃,模型组不予处理即处死,对照组以等剂量双蒸水灌胃。8周后,应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分别分离治疗组、模型组和对照组SAMP8内嗅区组织总蛋白,胶体考马斯亮蓝染色,ImageScanner图像扫描仪及ImageMaster双向凝胶电泳软件对图像进行扫描分析,将有意义的差异蛋白质点经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析得到肽质量指纹图谱(PMF),经MSDB和NCBInr数据库查询,鉴定差异蛋白质点。结果1.分别建立了治疗组、模型组和对照组SAMP8内嗅区组织的2-DE图谱。2.比较分析3组SAMP8内嗅区组织的2-DE图谱,发现治疗组与模型组存在32个差异点,其中12个在治疗组表达上调,9个表达下调,7个只在治疗组表达,4个只在模型组表达;治疗组与对照组之间的差异点同上述两组基本相似;而模型组与对照组无明显差异。3.鉴定了线粒体乌头酸酶、NADH脱氢酶铁硫蛋白6、电压依赖性阴离子通道1等14个差异蛋白,根据蛋白质数据库中提供的信息,发现这些差异蛋白质的功能涉及线粒体功能、氧化应激、神经细胞凋亡、神经元功能等方面,与AD发病密切相关。结论1.益智健脑颗粒可调节SAMP8内嗅区组织的多种蛋白质表达,提示该药具有多靶点治疗的作用。2.益智健脑颗粒可能通过改善线粒体功能障碍、抗氧化应激、抑制神经细胞凋亡、保护神经元等途径来实现其治疗AD的作用。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 前言
  • 第一章 双向凝胶电泳
  • 1.1 材料与方法
  • 1.1.1 材料
  • 1.1.2 方法
  • 1.2 结果
  • 1.2.1 总蛋白浓度测定
  • 1.2.2 双向凝胶电泳图谱的建立
  • 1.2.3 差异蛋白质点的识别
  • 第二章 质谱分析
  • 2.1 材料与方法
  • 2.1.1 材料
  • 2.1.2 方法
  • 2.2 结果
  • 2.2.1 差异蛋白质点的肽质量指纹图谱
  • 2.2.2 数据库搜索
  • 第三章 讨论
  • 3.1 快速老化小鼠的老化特征
  • 3.2 中医学对AD的认识
  • 3.3 益智健脑颗粒治疗AD的中医理论基础
  • 3.4 蛋白质组学技术应用于AD研究的优势
  • 3.5 差异蛋白质与AD及益智健脑颗粒作用机制的关系
  • 3.5.1 改善线粒体能量代谢相关蛋白
  • 3.5.2 抗氧化应激、抑制细胞凋亡相关蛋白
  • 3.4.3 保护神经元、改善脑能量代谢相关蛋白
  • 3.4.4 糖代谢相关蛋白
  • 第四章 结论
  • 参考文献
  • 综述
  • 致谢
  • 攻读学位期间的主要研究成果
  • 相关论文文献

    本文来源: https://www.lw50.cn/article/35fb0fc55c508135a41a1fbe.html