目的:研究PLA2、COX-2基因在胚胎先天性神经管缺陷大鼠的表达,探讨PLA2、COX-2基因对胚胎神经管缺陷大鼠模型的影响机制。方法:24只SD雌性大鼠分组分为3组:第一组为正常对照组,8只,正常饲养,妊娠12日后共取出80只大鼠胚胎,做HE染色观察胚胎形态学及免疫荧光染色的方法观察PLA2、COX-2表达;第二组为实验模型组,8只,受孕后第6天经过尾静脉注射链脲佐菌素（STZ）构建先天性神经管缺陷组大鼠,妊娠12日后共取出80胚胎,做HE染色观察胚胎形态学及免疫荧光染色的方法观察PLA2、COX-2表达,第三组为基因治疗组,受孕第6天经过尾静脉注射链脲佐菌素（STZ）构建先天性神经管缺陷组大鼠,妊娠12日后共取出80胚胎,离体培养1周后提取各组胚胎的卵黄囊细胞的mRNA,通过PCR技术对PLA2、COX-2基因水平分析,应用Western blotting技术,对卵黄囊细胞PLA2、COX-2蛋白表达水平检测,通过免疫荧光检测对胚胎进行观察分析。采用四表格χ2检验比较正常组与糖尿病组之间大鼠胚胎神经管发育的差异,PLA2、COX-2在胚胎神经管缺陷中表达的差异,比较转基因治疗前后PLA2、COX-2在胚胎神经管缺陷中表达的差异。使用统计学软件SPSS 16.1进行处理,检验水准α=0.05,p<0.05表示有统计学差异。结果:1.通过链脲佐菌素（STZ）构建的先天性神经管缺陷组大鼠成功实现。2.正常对照组大鼠胚胎神经管发育形态学分析正常,糖尿病胚胎神经管发育明显异常,两者存在统计学差异。（p<0.05）3.胚胎前列腺素酶PLA2及前列腺素合成酶COX-2在实验糖尿病组中表达较正常组下降,两者存在统计学差异。（p<0.05） 4.免疫荧光检查发现发现在接受基因治疗后的神经管缺陷胚胎PLA2、COX-2基因表达比转基因治疗前明显增强,两者存在统计学差异。（p<0.05）结论:PLA2、COX-2基因表达在SD大鼠神经管的发育过程中起着重要的作用,通过对胚胎神经管缺陷大鼠模型行PLA2、COX-2转基因治疗对神经管畸形具有较好的恢复作用。
本文来源: https://www.lw50.cn/article/39d1e994257a2ffbb8bf2a8e.html