【背景】上个世纪七十年代美国爆发“军团病”以来,已经有许多国家关于军团病的报道,我国南京在1982年首次证实军团菌病例。越来越多的证据表明军团菌感染与水源污染有关。本课题拟对中山医院的供水系统进行军团菌污染状况的调查,建立流行病学资料,并在医院微生物实验室里建立分离培养鉴定军团菌的技术平台,为今后相关的院内感染检测提供技术支持。【目的】1.对中山医院各病区供水系统(水龙头)进行军团菌的分离培养,了解军团菌的污染状况。2.用PCR技术对分离培养出的菌株进行鉴定。3.探讨不同的酸处理方法对军团菌生长的影响,评价其临床实用性。【方法】1.对中山医院27个病房的共52个水龙头进行采样,分离培养军团菌。2.分别用军团菌属特异性引物5srRNA和嗜肺军团菌感染力增强因子基因(mip)对细菌进行PCR方法鉴定。3.在嗜肺军团菌LP1细菌悬液中加入等量的酸处理液(PH2.2),放置不同的时间,然后接种GVPC平板,采用菌落计数比较不同的酸处理方法对军团菌生长的影响,同时比较不同的酸处理方法对嗜肺军团菌和铜绿假单胞菌混和液的作用,观察其对军团菌生长的影响及对铜绿假单胞菌的抑制作用。【结果】1.在所调查的27个病房中有9个存在军团菌污染,污染率为33.3%。在所采集的52份标本中共有12份检出军团菌,阳性率为23.1%。2.经PCR鉴定,这12株细菌为非嗜肺军团菌。3.就嗜肺军团菌本身而言,3～10分钟酸处理对其生长的影响较小(p＜0.05),对于混和液,3～15分钟酸处理均可抑制杂菌的生长,但3～5分钟的酸处理对军团菌的影响小。【结论】1.医院病房的水龙头军团菌污染严重,有发生院内感染的潜在危险,应引起相关部门的重视。2.对于环境标本,适当的酸处理既可抑制杂菌的生长,且对军团菌生长的影响小,可有效提高军团菌的检出率。而过度的酸处理降低了军团菌的分离率。
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