目的:探讨钙转运蛋白基因沉默联合顺铂治疗胃肠肿瘤的机制。方法:根据RNAi设计原理以及基因重组技术构建siRNA-CaT1表达载体,转染人胃癌细胞株BGC-823细胞中,通过MTT观察CaT1-RNAi、顺铂及二者联合作用对人胃癌细胞株BGC-823细胞增殖的抑制作用,通过RT-PCR、Westernblot观察凋亡相关基因及NF-κB的表达。结果:（1）成功地构建了针对CaT1基因的siRNA载体,转染细胞后可抑制Cat1基因表达。（2）MTT实验证明siRNA-CaT1及顺铂均能明显抑制人胃癌细胞株BGC-823细胞的增殖,二者联合作用的效果更明显。（3）siRNA-CaT1及顺铂联合作用能明显增加Bax/Bcl-2的比值及Caspase-3的表达,同时明显抑制Akt的表达。（4）siRNA-CaT1及顺铂联合作用能明显抑制IκB的表达,从而增加NFκBp65的表达。结论:在成功构建siRNA-CaT1有效表达质粒的基础上,证明siRNA-CaT1能够明显抑制人胃癌细胞株BGC-823细胞的增殖,且与顺铂具有协同作用。其机制可能与其抑制细胞存活基因Akt的表达有关,此外与其抑制IκB的表达,从而增加NFκBp65的表达,增加Bax/Bcl-2的比值、促进Caspase-3等凋亡相关基因表达有关。
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