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Mutacin(变链素)Ⅰ的原核表达及抗变形链球菌作用的研究

论文摘要

龋病是以口腔多种微生物为主多因素共同作用下形成的一种细菌感染性疾病,其中变形链球菌是公认的主要致病菌。变形链球菌生长和致病的微生态环境是牙菌斑生物膜。与浮游细菌相比,生物膜细菌对抗生素的抗性可提高10~1000倍。因此抗生素疗法对细菌生物膜引起的感染疗效欠佳。抗菌肽“antibacterial peptides”作为天然免疫中的主要效应分子,具有抗菌活性高、抗菌谱广、种类多、靶菌株不易产生抗性突变等优点,被认为将会在医药工业上有着广阔的应用前景。抗菌肽是由细菌核糖体合成的肽类抗生素,作为口腔主要致病菌的变形链球菌也能产生抗菌肽,我们称其为变链素(mutacin),对关系密切的细菌和其它的革兰氏阳性菌具有抑菌活性。变形链球菌CH43可以产生Ⅰ型变链素,对肠球菌、肺炎球菌和A型链球菌有一定的抑菌活性。本实验旨在获得编码变形链球菌CH43变链素Ⅰ成熟肽基因片段并诱导其在不杀伤工程菌的前提下高效表达,表达蛋白经纯化浓缩后作抗变形链球菌活性的研究。 本研究分为三个部分: 第一部分:获得编码变形链球菌CH43变链素Ⅰ成熟肽基因片段并构建其原核表达载体。主要实验内容为:厌氧条件下培养变形链球菌CH43

论文目录

  • 缩略语表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言和文献回顾
  • 一、细菌生物膜的研究进展
  • 二、抗菌肽的研究进展
  • 三、变链素的研究进展
  • 正文
  • 实验一:变形链球菌CH43变链素Ⅰ前体肽基因的克隆及原核表达载体的构建
  • 材料和方法
  • 1.实验材料
  • 2.溶液配制
  • 3.实验方法
  • 结果
  • 讨论
  • 实验二:pProEX-HTb-mutA载体诱导表达条件优化及融和蛋白的纯化
  • 材料和方法
  • 1.实验材料
  • 2.实验方法
  • 结果
  • 讨论
  • 实验三:纯化的融合蛋白对3种致龋菌抵制作用的体外研究
  • 材料和方法
  • 1.实验材料
  • 2.实验方法
  • 结果
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 致谢
  • 个人简历和研究成果
  • 相关论文文献

    本文来源: https://www.lw50.cn/article/453f10549c2196a6dd8468ea.html