变形链球菌葡聚糖结合蛋白B功能区片段克隆、原核表达及防龋初步研究

论文摘要

龋病是人类最常见的细菌感染性疾病之一,变形链球菌是公认的龋病的主要致龋菌。表面蛋白（PAc）、葡糖基转移酶（GTFs）、葡聚糖结合蛋白（Gbps）等是变形链球菌重要的毒力因子。免疫防龋是目前防龋研究的热点之一。葡聚糖结合蛋白作为变形链球菌表面的膜受体,能够与吸附于获得性膜内的葡糖基转移酶所合成的葡聚糖特异性结合,在细菌的初始粘附,集聚及菌斑的成熟过程中起重要的作用。葡聚糖结合蛋白B（GbpB）由于其良好的免疫原性,在免疫防龋研究中受到越来越多的重视。但是目前国内外的研究多集中于GbpB的全长基因,对于GbpB功能区基因片段的研究尚不多见。 本研究通过PCR技术克隆GbpB功能区基因片段,并将其克隆至原核表达载体pET-DsbA中,并通过蛋白重组融合表达技术使其在大肠杆菌中表达,成功得到其融合蛋白并进行纯化,用纯化的功能区蛋白进行葡聚糖结合功能实验并免疫SD大鼠观察其免疫原性及防龋效能。 本研究分为两个部分: 第一部分:葡聚糖结合蛋白B功能区片段克隆、原核表达及纯化 主要实验内容包括: 1.应用PCR技术扩增葡聚糖结合蛋白B功能区基因片段,定向插入

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