目的通过自组装IKVAV多肽纳米支架材料与鼠背根神经节(Dorsal Root Ganglion, DRG)联合培养,观察其对DRG及其神经元细胞(Dorsal Root Ganglion Neurons, DRGn)的生物学作用。方法IKVAV多肽两亲分子委托上海波泰生物科技公司合成。在IKVAV多肽溶于NaOH溶液中,调整PH至8.5,浓度为1wt%(0.01mg/ul),加DMEM/F12在盖玻片上触发多肽自组装为凝胶,透射电镜检测。取新生SD大鼠DRG及DRGn分为实验组与对照组,实验组中背根神经节及其游离细胞接种于二维凝胶表面,对照组接种于多聚赖氨酸表面。倒置相差显微镜观察DRG生长情况,免疫荧光染色结合镜下细胞计数检测凝胶材料的细胞毒性和对神经组织及细胞的粘附性。观察DRGn的存活和轴突生长情况,并行统计学分析。结果透射电镜示:自组装凝胶为编织状纳米纤维。实验组中DRG轴突生长情况优于对照组。培养1、3d后,两组中活细胞比例均无显著性差异。培养3、12h后,实验组中神经细胞粘附数显著高于对照组。实验组和对照组中DRGn培养1天后平均轴突长度分别为43.8±10.4μm、33.4±5.75μm。培养14天后实验组和对照组中DRGn数目分别为36.50±1.78/视野、19.70±3.71/视野,神经元所占比例分别为43.60±4.83%、26.97±4.90%。结论含IKVAV多肽凝胶材料能促进DRG生长和DRGn粘附,对细胞毒副作用小。并能降低神经元细胞死亡率,并诱导轴突的发生和生长,具有支架及生物活性双重作用,可作为优良的神经组织工程支架材料。
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